[发明专利]一种超声波辅助外源基因转化乳酸乳球菌的方法在审
申请号: | 201510594501.1 | 申请日: | 2015-09-17 |
公开(公告)号: | CN105219797A | 公开(公告)日: | 2016-01-06 |
发明(设计)人: | 杨胜利;张慧 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种超声波辅助外源基因转化乳酸乳球菌的方法,所述方法为:将携带外源基因的表达质粒与乳酸乳球菌感受态细胞悬液混合,在28~32℃、超声波场强200~500W的条件下进行转化反应,转化反应结束后,筛选获得含外源基因的乳酸乳球菌的阳性转化子;本发明所述超声波诱导基因转化方法更加环保,不依赖于细胞型,且转化率和电转化率相当,本发明转化率达到4.9×103个/μgDNA。 | ||
搜索关键词: | 一种 超声波 辅助 基因 转化 乳酸 球菌 方法 | ||
【主权项】:
一种超声波辅助外源基因转化乳酸乳球菌的方法,其特征在于,所述方法为:将携带外源基因的表达质粒与乳酸乳球菌感受态细胞悬液混合,在28~32℃、超声波场强200~500W的条件下进行转化反应,转化反应结束后,筛选获得含外源基因的乳酸乳球菌的阳性转化子;所述乳酸乳球菌感受态细胞悬液是由乳酸乳球菌感受态细胞与冰水预冷的溶液Ⅰ重悬而成;所述溶液Ⅰ组成为:0.4~0.6mol/L蔗糖,90~110mL/L甘油,溶剂为水。
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