[发明专利]绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法在审
申请号: | 201510551815.3 | 申请日: | 2015-09-01 |
公开(公告)号: | CN105063075A | 公开(公告)日: | 2015-11-18 |
发明(设计)人: | 张利平;丁强;张勇;吴建平;赵生国;贾建磊;王静;马晓明 | 申请(专利权)人: | 甘肃农业大学 |
主分类号: | C12N15/66 | 分类号: | C12N15/66;C12N15/70 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张真 |
地址: | 730070 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明涉及基因引物设计及载体构建方法。一种绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法,其特征在于通过反转录PCR扩增FecB基因片段,反转录PCR扩增方法为:94℃预变性4min;94℃40s,59℃40s,72℃1min 50s,35个循环,72℃10min,4℃保存;1%的琼脂糖检测。一种绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法,其特征在于通过反转录PCR扩增FecB基因片段,反转录PCR扩增方法为:94℃预变性4min;94℃40s,59℃40s,72℃1min 50s,35个循环,72℃10min,4℃保存;1%的琼脂糖检测。本发明构建了FecB基因的原核表达载体,该重组载体转化入感受态大肠杆菌BL21(DE3)体内后经过诱导可体外表达出FecB蛋白,免除了从组织中提取蛋白的繁琐步骤。为研究该蛋白创造有效途径。 | ||
搜索关键词: | 绵羊 fecb 基因 表达 载体 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种绵羊FecB基因原核表达载体的构建方法,其特征在于通过反转录PCR扩增FecB基因片段,反转录PCR扩增方法为:94℃预变性4min;94℃40s,59℃40s,72℃1min 50s,35个循环,72℃10min,4℃保存;1%的琼脂糖检测。
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