[发明专利]一种测定人血浆中丹参酮IIA磺酸钠浓度的方法

摘要

本发明属医学检验领域，涉及体内药物的分析测定方法，具体涉及一种可测定人血浆中丹参酮IIA磺酸钠浓度的方法。本方法采用氘5‑脱去氢表雄酮硫酸钠盐(DHEAS‑D5)为内标，在血样品处理过程中采用无紫外线黄光安全灯(去除420nm以下波长的光线)条件控制STS降解，保证方法的准确度；采用甲酸酸化血样后加入定量的有机溶媒甲醇和乙腈混合液沉淀蛋白，采用串联质谱法测定丹参酮IIA磺酸钠和内标的浓度，定量线性范围为2‑1000ng/mL，能满足人体药代动力学研究的要求；本方法样品取样少，预处理简单、快速、灵敏，仅需通用型的设备和试剂，分析周期短，成本低，适合于丹参酮IIA磺酸临床常规血药浓度的监测。

主权项

一种测定人血浆中丹参酮IIA磺酸钠浓度的方法，其特征在于，待测样品经预处理后，在酸性流动相下，经色谱柱分离，用串联质谱检测，包括以下步骤：1)样品预处理取待测样品于离心管中，加入内标工作液、经甲酸酸化后加入定量的有机溶媒沉淀蛋白，混旋，15000rpm离心后，吸取上清液，加含0.1％甲酸的50％甲醇水溶液，混匀，4℃待测；其中，采用氘5‑脱氢表雄酮硫酸钠盐DHEAS‑D5为内标；采用无紫外线黄光安全灯条件控制STS降解；所述甲酸为蛋白沉淀剂，其溶液浓度为5～15％；2)样品分离采用通用型的液相色谱柱，其填料为高强度硅胶颗粒C18，高效液相系统采用通用型高压泵和进样器，采用甲酸铵缓冲盐溶液和乙腈的混合液作为流动相，等度洗脱；等度洗脱模式为甲酸铵缓冲盐溶液：乙腈为60±10∶40±10，V/V；3)样品检测采用通用型串联质谱检测器检测丹参酮IIA磺酸钠和内标的峰面积；质谱电离方式：电喷雾离子源；极性：负离子检测；扫描方式：多反应离子检测扫描(MRM)；离子通道选择：STS：373.3→357.1amu，DHEAS‑D5：373.0→97.8amu；碰撞气：氮气；浓度计算采用串联质谱法以样品浓度为X轴，STS峰面积(As)和内标峰面积(Ai)的比值为Y轴，进行加权回归分析，采用标准曲线法获得未知血样的浓度值。