[发明专利]一种G蛋白‑偶联受体活体示踪方法及应用有效
| 申请号： | 201510434094.8 | 申请日： | 2015-07-22 |
| 公开（公告）号： | CN105018564B | 公开（公告）日： | 2017-03-08 |
| 发明（设计）人： | 赵欣;孙超;姜彩虹 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;C07K19/00;C12N15/85;C12N15/65;A61K49/00 |
| 代理公司： | 上海蓝迪专利商标事务所(普通合伙)31215 | 代理人： | 徐筱梅,张翔 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及分子影像学领域，具体地说是一种G蛋白‑偶联受体GPCR活体示踪方法，即在GPCR的非功能区插入一分子增强型绿色荧光蛋白eGFP，构建出一种新型的GPCR‑eGFP融合蛋白，以用于GPCR分子的成像和追踪。本发明以人视紫红质rhodopsin为例，它是广泛存在于脊椎动物视网膜视杆细胞膜上的光受体蛋白，其突变能造成蛋白不能插膜、错误折叠甚至聚集等，引发严重的眼部疾病。因此，构建rhodopsin‑eGFP融合蛋白并通过荧光来检测rhodopsin在细胞内的分布情况对于眼病研究具有重要的价值。本发明首次在rhodopsin的非功能区即第一个胞内环 CL1插入一分子eGFP，实验证明，本发明构建的新型的rhodopsinCL1‑eGFP融合蛋白具有与野生型蛋白相似的表达水平和功能，是rhodopsin相关眼病研究的有力工具。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白 受体 活体 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种G蛋白‑偶联受体细胞示踪方法，其特征在于该方法是：在G蛋白‑偶联受体GPCR的非功能区，即第一个胞内环区CL1插入一分子增强型绿色荧光蛋白eGFP，在不干扰GPCR功能的前提下实现GPCR‑eGFP的融合表达，通过GPCR分子的荧光标记，实时检测GPCR在细胞中的分布，同时避免eGFP对GPCR重要功能区C端及下游信号传导的干扰。
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