[发明专利]一种宝兴百合组培快繁和离体保存方法

摘要

一种宝兴百合组培快繁和离体保存方法，包括获取外植体、诱导不定芽与增殖培养、鳞茎增大及生根培养、离体保存、移栽步骤，以宝兴百合的鳞片为外植体，建立宝兴百合的组培快繁和离体保存体系，增值系数高达1∶10，离体保存继代周期达4年以上。该方法有效地解决了宝兴百合的组培快繁问题，大大延长了离体保存周期，有利于宝兴百合种质资源的保存和开发利用，为宝兴百合的育种奠定了基础。

主权项

宝兴百合的组培快繁和离体保存方法，所述的宝兴百合的组培快繁是取宝兴百合的中层鳞片进行消毒后，接种在不定芽诱导和增殖培养基上，获得小鳞茎后，转接到使鳞茎增大及生根的培养基中，经过炼苗处理后，移栽；所述的宝兴百合的离体保存是去除长根且增大的鳞茎的根和叶，置于离体保存培养基中，在低温条件下培养，离体保存周期延长至4年；所述不定芽诱导和增殖培养基为(1)：MS+BA 0.5mg/L+2,4‑D 1.0mg/L；使鳞茎增大及生根培养基为(2)：MS+PPP333 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L；离体保存培养基为(3)：MS+PPP333 0.3mg/L+BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L+TDZ 0.06mg/L；以上培养基(1)和(3)添加蔗糖20g/L，(2)添加蔗糖90g/L，(2)和(3)添加活性炭1‑2g/L；所有培养基均添加琼脂5.6g/L固化，pH5.8，除离体保存培养条件为13±2℃外，其余培养温度均为25±2℃，光照强度10‑20μmol/(m2·s)，光照12h/d。