[发明专利]一种焦磷酸测序文库的构建方法有效
申请号: | 201510414230.7 | 申请日: | 2015-07-15 |
公开(公告)号: | CN104962551A | 公开(公告)日: | 2015-10-07 |
发明(设计)人: | 高静;蔡亦梅;徐潇;吴超;张睿;王者馥;王绪敏;殷金龙;任鲁风 | 申请(专利权)人: | 北京中科紫鑫科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68;C40B50/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 101111 北京市大兴区经济技术开发区科创六街*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明属于基因工程及分子生物学领域,具体涉及一种焦磷酸测序文库的构建方法。构建方法包括以下步骤:样品DNA提取及定量,DNA片段化、纯化及片段选择,末端补平,加A尾,Y接头连接,在接头上设计多个标签,小片段去除,PCR扩增,获得扩增产物,即为DNA文库,变性为单链。使用本发明的方法得到的文库纯度高,用以测序得到的结果准确度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 磷酸 序文 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种焦磷酸测序文库的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:样品DNA提取及定量;DNA片段化、纯化及片段选择:DNA片段化,进行目的片段的纯化、回收,片段的定量和选择;末端补平,加A尾:对DNA进行末端补平,在3’端加A尾;Y接头连接:接头包括正向接头和反向接头,正向接头和反向接头退火形成一个部分互补配对的Y型接头;在接头上设计多个标签,可以一次处理多个样品;小片段去除;PCR 扩增,获得扩增产物,即为双链DNA文库;(8) 变性为单链,使双链DNA文库变为焦磷酸测序文库。
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