[发明专利]一种检测HLA‑B*13:01等位基因的多重实时荧光PCR方法

摘要

本发明研发出适宜于实时荧光PCR反应高特异性扩增HLA‑B*1301等位基因的特异性引物探针组合，主要包括F15’‑GGGCCAGGGTCTCACATCA‑3’R15’‑GAGCCACTCCACGCAGTC‑3’F25’‑ACAGGGGCTAACGCAGA‑3’R25’‑CAACACCACAACCATCAAG‑3’Probe15’‑HEX‑AGGATGTATGGCTGCGACCTGG‑BHQ2‑3’Probe25’‑CY5‑ATACATCCGTGCTTCATTGTCAC‑BHQ2‑3’；并基于此提供了一种快速、简便、高通量、高特异性检测该等位基因的方法。

主权项

用于多重荧光PCR反应检测HLA‑B*13:01等位基因的特异性引物探针组合，其特征在于，包括以下引物和探针序列：第一条上游引物F1：5’‑GGGCCAGGGTCTCACATCA‑3’第一条下游引物R1：5’‑TCCTTGCCGTCGTAGGCT‑3’第二对上游引物F2：5’‑ACAGGGGCTAACGCAGA‑3’第二对下游引物R2：5’‑CCCAACACCACAACCATCAAG‑3’第一条探针Probe1：5’‑HEX‑AGGATGTATGGCTGCGACCTGG‑BHQ2‑3’第二条探针Probe2：5’‑CY5‑ATACATCCGTGCTTCATTGTCAC‑BHQ2‑3’其中，HEX为6‑carboxy‑hexachlorofluorescein；CY5为Cyaine5；BHQ2为Black Hole Quencher‑2。