[发明专利]嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白及其应用在审
申请号: | 201510367203.9 | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN104961811A | 公开(公告)日: | 2015-10-07 |
发明(设计)人: | 郑宗林;黄朝芳;王广军 | 申请(专利权)人: | 郑宗林;黄朝芳 |
主分类号: | C07K14/195 | 分类号: | C07K14/195;C12N15/70;C12N15/31;A61K39/02;A61P31/04 |
代理公司: | 北京国智京通知识产权代理有限公司 11501 | 代理人: | 王昌贵 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白及其应用,所述蛋白将外膜蛋白基因片段克隆入原核表达载体pET-30a得到重组表达载体,将重组表达载体转化大肠杆菌获得重组大肠杆菌,将所述重组大肠杆菌接种于Amp抗性的LB平板培养至OD600达0.6时,加入IPTG至终浓度为1.0mmol/L进行诱导表达,经纯化后获得嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白。本发明方法成功构建了嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白,使其可作为对鱼具有保护作用的疫苗,比较研究了嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白pompA在不同FIA作用下对斑点叉尾鮰的免疫效果。为进一步研究ompA及其能否作为基因工程亚单位疫苗的候选成分奠定基础。 | ||
搜索关键词: | 水气 单胞菌外 膜蛋白 基因 表达 蛋白 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白,其特征在于,所述蛋白将外膜蛋白基因片段克隆入原核表达载体pET‑30a得到重组表达载体,将重组表达载体转化大肠杆菌获得重组大肠杆菌,将所述重组大肠杆菌接种于Amp抗性的LB平板培养至OD600达0.6时,加入IPTG至终浓度为1.0mmol/L进行诱导表达,经纯化后获得嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白,所述的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白氨基酸序列为SEQ ID NO.1,所述的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因核苷酸序列为SEQ ID NO.2。
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