[发明专利]嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白及其应用在审
申请号: | 201510367203.9 | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN104961811A | 公开(公告)日: | 2015-10-07 |
发明(设计)人: | 郑宗林;黄朝芳;王广军 | 申请(专利权)人: | 郑宗林;黄朝芳 |
主分类号: | C07K14/195 | 分类号: | C07K14/195;C12N15/70;C12N15/31;A61K39/02;A61P31/04 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水气 单胞菌外 膜蛋白 基因 表达 蛋白 及其 应用 | ||
1.一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白,其特征在于,所述蛋白将外膜蛋白基因片段克隆入原核表达载体pET-30a得到重组表达载体,将重组表达载体转化大肠杆菌获得重组大肠杆菌,将所述重组大肠杆菌接种于Amp抗性的LB平板培养至OD600达0.6时,加入IPTG至终浓度为1.0mmol/L进行诱导表达,经纯化后获得嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白,所述的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白氨基酸序列为SEQ ID NO.1,所述的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因核苷酸序列为SEQ ID NO.2。
2.一种权利要求1所述的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白的应用,其特征在于,所述的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白可作为抗原在制备预防嗜水气单胞菌的疫苗制剂中使用。
3.根据权利要求2所述的一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白的应用,其特征在于,所述预防嗜水气单胞菌的疫苗制剂还包括弗式不完全佐剂。
4.根据权利要求3所述的一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白的应用,其特征在于,所述弗式不完全佐剂与所述嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白体积比为1:1。
5.根据权利要求4所述的一种嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白的应用,其特征在于,所述的预防嗜水气单胞菌的疫苗制剂的制备方法包括以下步骤:在无菌注射器中加入制备好的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因原核表达蛋白,用移液器向所述无菌注射器中加入等体积的弗式不完全佐剂,乳化5min后,用注射器反复推进,直至水相与油相完全融到一起乳化完全,形成油包水的乳白色液滴,即制成疫苗制剂。
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