[发明专利]利用DAPI嵌入和释放模拟DNA纳米折纸结构作为药物载体的方法

摘要

本发明涉及一种通过DNA滚环扩增技术以及DNA折纸术构建的DNA纳米折纸结构，同时利用有DNA双链结合特性以及细胞膜穿透特性的荧光染料DAPI对DNA纳米折纸结构进行标记跟踪，实现实时监控以及模拟DNA纳米折纸结构作为药物载体的载药、缓释过程，也可作为一种新的荧光定量分析方法应用于生物分子检测，如肿瘤的早期检测、术后监测评估以及细胞成像等领域。

主权项

一种利用DAPI嵌入和释放模拟DNA纳米折纸结构作为药物载体的方法，其特征在于，通过DNA滚环扩增技术得到长单链DNA作为支架链，加入订书钉链后进行折纸得到二维DNA纳米折纸结构，具备DNA双链强力结合能力的荧光染料嵌入其中，通过嵌入后荧光强度的增高以及DNA纳米折纸复合结构降解后染料释放导致荧光强度下降过程监控DNA纳米折纸结构的稳定性并模拟其作为抗肿瘤药物载体的药物负载及缓释过程；所述的DNA滚环扩增技术，环模板为一碱基数为96的闭合单链DNA，且序列为：5’‑TATGCCCAGCCCTGTAAGATGAAGATAGCGCACAATGGTCGGATTCTCAACTCGTATTCTCAACTCGTATTCTCAACTCGTCTCTGCCCT GACTTC‑3’；所述的订书钉链共三条，每条都能与长单链DNA进行互补杂交，且序列分别为，订书钉链1：5’‑CAGCCCTGTAAGATGAAGATAGCGTCTATGCC‑3’；订书钉链2： CCCTGACTCACAATGGTCGGATTCCGTCTCTG；订书钉链3： TCTCAACTTCAACTCGTATTCTCAACTCGTAT；所述的支架链加入订书钉链后得到二维DNA纳米折纸结构，制备条件是：高温95℃，三分钟，后每降0.2℃，持续20s，直至4℃；所述的二维DNA纳米折纸结构，长度可达微米级，宽度为16nm；所述的具备DNA双链强结合能力的荧光染料，嵌入双链之前荧光微弱，而嵌入后则荧光值大大增强，且能穿透细胞膜的4’，6‑二脒基‑2‑苯基吲哚（4’,6‑diamidino‑2‑phenylindole，DAPI）；所述的DNA纳米折纸复合结构与DAPI形成的复合结构或通过电纺技术所得的DNA纳米折纸结构膜与DAPI形成的复合结构。