[发明专利]PNA钳位实时定量PCR检测HBV线性DNA比例有效
申请号: | 201510292094.9 | 申请日: | 2015-06-01 |
公开(公告)号: | CN104894258B | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
发明(设计)人: | 潘孝本;魏来 | 申请(专利权)人: | 北京大学人民医院 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686 |
代理公司: | 北京天达共和知识产权代理事务所(特殊普通合伙)11586 | 代理人: | 龚建华 |
地址: | 100044 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种PNA钳位实时定量PCR检测HBV线性DNA比例的方法,包括如下步骤(1)用DNA聚合酶和核酸内切酶对HBV DNA模板进行预处理,产生相差12个碱基的不同模板;(2)利用引物对和肽核酸对dlDNA进行选择性扩增,(3)根据定量PCR检测结果中的HBV dlDNA定量值和总HBV DNA,计算得到dlDNA比例。灵敏度和准确度较高,弥补了经典的Southern‑Blot法的半定量,操作复杂,灵敏度低等局限性。为进一步检测分析慢乙肝患者血清中HBV dlDNA比例检测提供了技术支持。 | ||
搜索关键词: | pna 实时 定量 pcr 检测 hbv 线性 dna 比例 | ||
【主权项】:
一种PNA钳位实时定量PCR检测HBV线性DNA比例的方法,包括如下步骤:(1)用DNA聚合酶和Hpy8 I核酸内切酶对HBV DNA模板进行预处理,产生相差12个碱基的不同模板;(2)利用引物对和肽核酸对dlDNA进行选择性扩增;(3)根据定量PCR检测结果中的HBV dlDNA定量值和总HBV DNA,计算得到dlDNA比例,其中所述引物和PNA序列以及相应位置见表1‑1。
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