[发明专利]一种利用无血清培养基通过转分化获得神经细胞的方法有效
申请号: | 201510289740.6 | 申请日: | 2015-05-29 |
公开(公告)号: | CN106282113B | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 郑辉;何松蔚 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079 |
代理公司: | 12211 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张会雪 |
地址: | 510530 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用无血清培养基通过转分化获得神经细胞的方法,主要涉及向细胞的基础培养基中添加少量代血清添加剂、酪氨酸激酶类生长因子以及小分子化合物,获得一种新型的无血清培养基,以及使用该新型无血清培养基将不同来源的体细胞或者成体干细胞直接转分化为神经细胞的方法。利用本发明制得的无血清培养基可以在不借助外源性转录因子高表达的条件下,将不同来源的体细胞或者成体干细胞直接转分化为神经细胞。为今后神经细胞在临床疾病治疗中应用提供技术支撑。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 血清 培养基 通过 分化 获得 神经细胞 方法 | ||
【主权项】:
1. 用于将体细胞直接转分化成为神经细胞的无血清培养基,其特征在于:该无血清培养基由基础培养基、代血清添加剂、酪氨酸激酶类生长因子、小分子化合物以及适于细胞生长的其它组分组成;所述代血清添加剂为N2、B27, 或者是N2和B27的混合物,在最终培养基中N2的浓度在0%-1%之间,B27的浓度在0%-2%之间,但N2、B27不同时为零,%均指体积浓度;所述酪氨酸激酶类生长因子为bFGF,EGF,或者是bFGF和EGF的混合物,在最终培养基中bFGF的浓度在0-40ng/ml之间,EGF的浓度在0-40ng/ml之间,但bFGF、EGF不同时为零;所述小分子化合物为维生素C,在最终培养基中,维生素C的浓度在10-200μg/ml之间;适于细胞生长的其它组分为NEAA、GlutaMax以及2-巯基乙醇的组合,2-巯基乙醇的终浓度为0.1mM;所述体细胞为小鼠胚胎成纤维细胞或大鼠神经胶质细胞。/n
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