[发明专利]含有人SLC3A2基因的慢病毒载体及其构建方法在审
| 申请号： | 201510255540.9 | 申请日： | 2015-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN106282235A | 公开（公告）日： | 2017-01-04 |
| 发明（设计）人： | 王宗保;肖国华;郑兴;佘美华;郑曲通;丁婧璇;姚艳;张昕 | 申请（专利权）人： | 南华大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/12 |
| 代理公司： | 北京卓恒知识产权代理事务所(特殊普通合伙)11394 | 代理人： | 唐曙晖 |
| 地址： | 421001 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种含有人SLC3A2基因慢病毒载体的构建方法，包括以下步骤：用PCR方法扩增人SLC3A2基因，利用基因工程技术将目的基因SLC3A2序列片段连接到LV5载体上，构建其基因重组载体，然后进行病毒包装，最后用荧光定量PCR进行病毒滴度的测定。将含人基因SLC3A2慢病毒载体与宁乡花猪精子细胞在不同条件下进行孵育，利用免疫荧光法和半定量PCR法检测SLC3A2的表达情况。本发明的有益效果为：插入的基因能够在体内稳定表达，生物安全性较高，是制备转基因小型猪动物模型的一项关键技术。 | ||
| 搜索关键词： | 有人 slc3a2 基因 病毒 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
构建含有SLC3A2基因的慢病毒载体的方法，包括以下步骤：(A)用PCR方法扩增SLC3A2基因；(B)将目的基因SLC3A2克隆到慢病毒载体中；(C)制备感受态细胞；(D)将步骤(B)制备的慢病毒载体转化感受态细胞；(E)从平板上挑取克隆菌落，小抽质粒并做鉴定挑出阳性克隆；(F)纯化提取的质粒，将抽提好的质粒进行双酶切鉴定。
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