[发明专利]一种检测蔬果中赭曲霉毒素A的方法

摘要

本发明公开了一种检测蔬果中赭曲霉毒素A的方法，该方法以乙腈、四氢呋喃作为萃取剂，采用超声波快速萃取法进行萃取，再速离心取上清，这样极大的提高了萃取效率，降低了样品的基质效应，适用性强；再将上清用赭曲霉毒素A免疫亲和柱进行净化，最后定容并过0.22μm有机相滤膜，得到上机待测液，这样操作简单，净化效果好；本方法适用于多种蔬果中赭曲霉毒素A的测定，该色谱技术花费低，分离效果及色谱重现性好，可用于复杂基体中痕量组的赭曲霉毒素A定量快速测定。

主权项

一种检测蔬果中赭曲霉毒素A的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）样品前处理：取蔬果样品碾碎，加入萃取剂，混匀，采用超声波快速萃取30～60min，萃取温度为30～40℃，离心，取上清，将上清过赭曲霉毒素A免疫亲和柱纯化，依次用真菌毒素清洗缓冲液、水淋洗免疫亲和柱，然后用甲醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液过滤，取滤液得到待测样品溶液；所述萃取剂为乙腈和四氢呋喃的混合液，其中乙腈和四氢呋喃的体积比为1：1；2）建立赭曲霉毒素A标准曲线；3）用液相色谱仪荧光检测器检测样品溶液，通过标准曲线和回归方程计算得到待测样品溶液中赭曲霉毒素A的浓度，进而计算得出样品中赭曲霉毒素A的含量；所述液相色谱仪荧光检测器检测为高效液相色谱仪荧光检测器检测，检测时的条件如下：a)色谱柱：c18柱5μm，150mm×4.6mm；b)流动相：为乙腈、水、冰乙酸按体积比为49.5:49.5:1的混合液；c)柱流速：0.9mL/min；d)柱温：35℃；e)进样量：10μL；f)检测波长：激发波长333nm，发射波长477nm。