[发明专利]用于制备细菌素durancinGL的重组菌、制备方法及应用有效
申请号: | 201510067196.0 | 申请日: | 2015-02-10 |
公开(公告)号: | CN104593313B | 公开(公告)日: | 2018-03-30 |
发明(设计)人: | 鞠兴荣;陈信全;都立辉;袁建;何荣;和肖营;吴学友;刘凌平;施荣华 | 申请(专利权)人: | 南京财经大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/31;C12P21/02 |
代理公司: | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙)32238 | 代理人: | 袁静 |
地址: | 210023 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供用于制备细菌素durancin GL的重组菌、制备方法及应用,涉及微生物生物技术领域。所述重组菌携带由细菌素durancin GL、纯化标签和酶切位点相连形成的融合蛋白的编码基因。制备细菌素durancin GL方法如下,诱导重组菌表达融合蛋白,破碎得到裂解液,离心取上清液,采用HisTrap HP柱和GSTrap 4B柱分离或者采用GSTrap 4B柱分离,收集洗脱峰,采用肠激酶酶解,除去纯化标签,得到细菌素durancin GL。本发明重组菌构建方便,能够高效表达重组细菌素durancin GL,通过亲和色谱进行高效分离,水解酶切位点后得到具有活性的细菌素durancin GL。 | ||
搜索关键词: | 用于 制备 细菌 durancin gl 重组 方法 应用 | ||
【主权项】:
用于制备细菌素durancin GL的重组菌,其特征在于所述重组菌携带由细菌素durancin GL、纯化标签和酶切位点相连形成的融合蛋白的编码基因,所述纯化标签是GST标签通过酰胺键与His标签相连而成,所述酶切位点是肠激酶酶切位点,所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;将由细菌素durancin GL、纯化标签和酶切位点相连形成的融合蛋白的编码基因插入表达载体得到重组载体;将所述重组载体转化大肠杆菌,得到所述重组菌;所述重组载体是将由细菌素durancin GL、酶切位点相连形成的融合蛋白的编码基因插入表达载体pGEX‑6P‑1后获得。
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