[发明专利]一种禽用多联特异性卵黄抗体及转移因子的制备方法

摘要

本发明公开了一种禽用多联特异性卵黄抗体及转移因子的制备方法，将多种禽类疾病的疫苗联合免疫产蛋鸡，获得有免疫抗体的鸡蛋，将卵黄组织破碎，离心获得上清液，通过微孔过滤除去脂蛋白和脂肪，收取滤液，经超滤器进行超滤，得到特异性卵黄抗体粗制品和副产物特异性卵黄转移因子生物制品，用有机溶剂沉淀法分离纯化卵黄抗体，最终得到精制多联特异性卵黄抗体。本发明方法操作简单，生产的多联特异性卵黄抗体可预防治疗多种禽病，生产过程还可以产出卵黄转移因子生物制品，具有节能、减排、增产、增效的效果。

主权项

1.一种禽用多联特异性卵黄抗体及转移因子的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：1)将禽类疾病的疫苗通过腿部或翅下肌注方法，联合免疫产蛋鸡，第一次免疫后7～10d，进行第二次加强免疫，第二次免疫后5～7d，收集含有免疫抗体的鸡蛋；2)连续收集高免产蛋鸡的鸡蛋，每隔一个月加强免疫一次，再继续收集鸡蛋，直到产蛋鸡被淘汰；3)将收集的鸡蛋清洗，放入70％酒精浸泡10min，晾干后分离蛋黄；4)用高压均质机在60Pa条件下进行卵黄组织破碎，加蒸馏水后搅拌均匀；5)调节卵黄溶液的PH，离心去除沉淀脂蛋白，收取上清液；6)上清液经压力微孔过滤进一步除去脂蛋白和脂肪，收取滤液；7)将以上滤液经超滤器进行超滤，收集被截留的液体为特异性卵黄抗体粗制品，滤液为多联特异性卵黄转移因子生物制品；8)取卵黄抗体粗提液中加冷酒精，使卵黄抗体粗提液质量浓度为50～60％，充分搅拌使其混浊沉淀，在4000r/min离心20～30min，收集沉淀物；9)加蒸馏水恢复到所取卵黄抗体粗提液体积，然后加冷酒精使其浓度达到25～30％，充分搅拌使其混浊沉淀，在4000r/min离心20～30min，收集沉淀物，此过程重复两次；10)收取沉淀物，加适量蒸馏水使其沉淀物溶解或在37℃温箱烤干，即为精制多联特异性卵黄抗体；其中：步骤(1)中所述的含有免疫抗体的鸡蛋为检测得到抗体效价大于1×10^‑4的鸡蛋；所述的禽类疾病的疫苗为防治禽流感、新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊炎、鸡球虫病、鸡白痢、鸭瘟、鸭肝炎、鸡支原体病或鸡大肠杆菌病中一种或多种混合疫苗。