[发明专利]一种花椰菜杂交种指纹图谱及其构建方法

摘要

本发明属于分子生物技术领域，具体为一种花椰菜杂交种指纹图谱及其构建方法。该花椰菜杂交种暂时被命名为“申雪108天”，是由上海富农种业有限公司经过多年杂交繁育的新花椰菜品种。本发明利用SSR分子标记对“申雪108天”进行定性标记，建立其区分其他近缘种或同系列的花椰菜品种的指纹图谱。适用于花椰菜“申雪108天”品种的认定、销售和农户甄别真假。本发明易于掌握，可保护生产者和种子购买者的利益。

主权项

一种花椰菜杂交种“申雪108天”指纹图谱的构建方法，其特征在于，以花椰菜杂交种“申雪108天”作为实验材料，利用特有的SSR引物进行分子标记实验，制作花椰菜杂交种“申雪108天”指纹图谱；其中：所述特有的SSR引物为BRMS05引物，所述BRMS05引物的核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；所述利用特有的SSR引物进行分子标记实验，反应体系如下：MgCl2，2.5mmol·L‑1，dNTPs 0.2mmol·L‑1，100ng SSR引物，0.1U Taq聚合酶，1μl 10×PCRBuffer，35ng DNA模板；反应程序为：94℃预变性2min，1个循环；94℃变性1min，63℃退火1min，72℃延伸1min，共30个循环；72℃延伸10min，1个循环；所述的花椰菜杂交种“申雪108天”的指纹图谱：以1和0分别代表某个等位基因位点扩增DNA条带的有无，按照从上到下即由大片段向小片段的读带方向，将分子标记指纹图谱转换为由1和0组成的字符串，构成数字指纹图谱，所述的花椰菜杂交种“申雪108天”指纹图谱的数字指纹为1111。