[发明专利]用于检测人类EGFR基因突变的引物、探针及试剂盒

摘要

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于检测人类EGFR基因突变的引物、探针及试剂盒。本发明的探针和引物共有7组，其可以准确检测人类EGFR基因上的29种常见突变。采用本发明引物和探针的试剂盒，其灵敏度高，在20ng野生型人类基因组的背景下可以检出1％的微量突变模板，减少了假阴性结果的出现。另外，所述试剂盒操作简便，可控性强，可进行大批量样品的检测，有利于临床操作。

主权项

一种用于检测人类EGFR基因突变的引物及探针，其包含下列7组引物和探针中的任意一组或多组，具体为：(1)正向引物：5’—CAAAAAGATCAAAGTGCTGAC—3’正向引物：5’—CAAAAAGATCAAAGTGCTGA—3’正向引物：5’—CAAAAAGATCAAAGTGCCGT—3’反向引物：5’—ACAGCTTGCAAGGACTCTGG—3’探针：5’—FAM/CCGGTGCGTTCGGCACGGTGTAT/BHQ1—3’；(2)正向引物：5’—CACTGGGCAGCATGTGGC—3’反向引物：5’—CAGCTGCCAGACATGAGAAA—3’探针：5’—FAM/GCCAACAAGGAAATCCTCGATGTGAG/BHQ1—3’阻断核酸序列：5’—CGACAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAG‑PO4—3’；(3)正向引物：5’—CAGCGTGGCCAGCGTG—3’正向引物：5’—TGATGGCCAGCGTGGACG—3’正向引物：5’—TGATGGCCAGCGTGGACG—3’反向引物：5’—AGGATCCTGGCTCCTTATCTC—3’探针：5’—FAM/GCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCT/BHQ1—3’；(4)正向引物：5’—GGAAGCCTACGTGATGGCCAT—3’反向引物：5’—AGGATCCTGGCTCCTTATCTC—3’探针：5’—FAM/GCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCT/BHQ1—3’；(5)正向引物：5’—CTCCACCGTGCAGCTCATCAT—3’反向引物：5’—AGGATCCTGGCTCCTTATCTC—3’探针：5’—FAM/GCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCT/BHQ1—3’；(6)正向引物：5’—GTCAAGATCACAGATTTTGGGCG—3’反向引物：5’—AGCCTGGTCCCTGGTGTCAG—3’探针：5’—FAM/CTGGGTGCGGAAGAGAAAGAATACC/BHQ1—3’；(7)正向引物：5’—GATTTTGGGCTGGCCAAACA—3’反向引物：5’—AGCCTGGTCCCTGGTGTCAG—3’探针：5’—FAM/CTGGGTGCGGAAGAGAAAGAATACC/BHQ1—3’。