[发明专利]一种检测人复制蛋白变体含量的胶乳增强免疫比浊试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测人复制蛋白变体含量的胶乳增强免疫比浊试剂盒。该试剂盒包括试剂R1、试剂R2和复制蛋白变体标准品，其中试剂R1包含电解质、促凝剂、防腐剂及缓冲液；试剂R2包含抗人复制蛋白变体的多克隆抗体包被的胶乳颗粒、电解质、稳定剂、防腐剂及缓冲液；标准品为含有不同浓度复制蛋白变体的适当缓冲液。本试剂盒特异性强，灵敏度高，准确度好，操作快速简便，可用于各种生化分析仪。

主权项

一种检测人复制蛋白变体含量的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于该试剂盒包括试剂R1、试剂R2和复制蛋白变体标准品溶液，其中：所述试剂R1包含电解质、促凝剂、防腐剂及缓冲液；所述试剂R2包含抗人复制蛋白变体的多克隆抗体包被的胶乳颗粒、电解质、稳定剂、防腐剂及缓冲液；所述的抗人复制蛋白变体的多克隆抗体为通过合成如SEQ ID NO.1所示的CIZ1‑V第14、15号外显子基因表达的突变片段多肽，将合成的多肽偶联至血蓝蛋白载体蛋白上制备抗原并免疫兔、羊、鸡、再经亲和层析纯化获得的免疫球蛋白；所述复制蛋白变体标准品溶液为含有不同浓度复制蛋白变体标准品的缓冲液；所述的复制蛋白变体标准品通过以下方法制备：合成如SEQ ID NO.1所示的CIZ1‑V第14、15号外显子基因表达的突变片段多肽，将合成的多肽偶联至卵白蛋白(OVA)载体蛋白得到复制蛋白变体标准品；所述的胶乳颗粒为直径范围0.05‑0.20μm的聚苯乙烯胶乳颗粒，试剂R2中胶乳颗粒浓度为0.1%‑0.8%；试剂R1中所述促凝剂选自浓度为2.5%的PEG6000或不同PEG的混合体；试剂R1中所述的电解质选自氯化钠、氯化钾、氯化镁，浓度为0.01%‑1.5%；试剂R2中所述的电解质选自氯化钠、氯化钾、氯化镁，浓度为0.01%‑1%；试剂R1和R2中所述的防腐剂选自叠氮钠，浓度为0.05%‑0.1%；所述的缓冲液选自PBS缓冲液、Hepes缓冲液、MES缓冲液、Tris‑HCl缓冲液、甘氨酸缓冲液、醋酸缓冲液或DIPSO缓冲液中的一种，缓冲液浓度在20‑200mM之间；试剂R2中所述的稳定剂选自牛血清白蛋白和EDTANa2，浓度为0.1%‑1.0%。