[发明专利]一种固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法

摘要

本发明是一种固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法。利用磷脂酶C脱胶提高油脂得率这一特点，先采用少量PLC进行常规酶法脱胶操作，而后利用磷脂酶A1脱胶彻底速度快的特点，加入适量PLA1实施脱胶操作，考察PLC和PLA1的加入时间，加入量之比以及之间的关系。最终确定的最佳条件为：固定化磷脂酶C在固定化酶添加量0.14g/kg，初始PH值为7.0，反应温度为50℃，搅拌速度为250r/min，反应时间为1.5h。然后加入磷脂酶A1在固定化酶添加量0.12g/kg，初始PH值为6.0，反应温度为50℃，搅拌速度为250r/min，反应时间为1.0h，在此最佳条件下测得脱胶油中的磷含量为4.3mg/kg，DAG增加率为1.3%，节省时间约两小时，为以后工业化生产脱胶工艺提供了依据。

主权项

一种固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法，其特征在于用固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1大豆毛油脱胶的方法通过以下步骤实现：一、磷脂酶C和磷脂酶A1的固定化：首先称取一定量的海藻酸钠于40℃水浴保温溶解，同时称取一定量的壳聚糖于5%的醋酸溶液中，40 ℃水浴保温溶解；再向溶解的壳聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，混匀，称取一定量的磷脂酶A1，加入到10 mL海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，静置一段时间，用灭菌后的注射器吸取混合液，以约5滴/s的速度注入壳聚糖醋酸溶液、CaCl2混合溶液中，以180 r/min转速搅拌，将其置于4℃环境固定化10 h，以同样的方法对磷脂酶C进行固定；二、固定化酶脱胶：取水化大豆毛油300 g，预热至75℃，加入45%柠檬酸0. 6 mL混合搅拌维持30 min；冷却至温度为30~40℃左右，加入4 mol/L NaOH溶液和一定量的蒸馏水混合均匀，固定化磷脂酶C在固定化酶添加量0.14 g/kg，初始PH值为7.0，反应温度为50 ℃，搅拌速度为250 r/min，反应时间为1.5 h，然后加入磷脂酶A1在固定化酶添加量0.12 g/kg，初始PH值为6.0，反应温度为50℃，搅拌速度为250 r/min，反应时间为1.0 h，在此最佳条件下测得脱胶油中的磷含量为4.3 mg/kg，DAG增加率为1.3%，节省时间约两小时，同时确定了固定化磷脂酶C和固定化磷脂酶A1连续用于对大豆毛油的脱胶，使用6个批次后，测定固定化酶相对活力，结果酶活力仍保持在80％左右。