[发明专利]一种低分子量硫酸软骨素的制备方法在审
申请号: | 201510016094.6 | 申请日: | 2015-01-13 |
公开(公告)号: | CN104498564A | 公开(公告)日: | 2015-04-08 |
发明(设计)人: | 石国宗;潘启胜;林颖珺;秦飞;陈静 | 申请(专利权)人: | 厦门蓝湾科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/26 | 分类号: | C12P19/26 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361006 福建省厦门市厦门*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 一种低分子量硫酸软骨素的制备方法,涉及硫酸软骨素。将鲟鱼煮沸去除肌肉、脂肪等表面附着物,用石油醚浸泡后,用乙醇冲洗,烘干、粉碎得软骨颗粒;在软骨颗粒加入NaOH溶液,第一次搅拌后,用酸调节pH至中性,得软骨母液;在软骨母液中先加入苹果酸,调节pH至3.0~3.2,再加入胃蛋白酶,第二次搅拌,调节pH至5.0~5.5,然后加入木瓜蛋白酶和纤维素酶,第三次搅拌后,加入活性炭,第四次搅拌,过滤得澄清酶解液;将所得酶解液经树脂吸附,用NaCl溶液梯度洗脱,利用间苯三酚分光光度法检测,合并收集具有显色反应的洗脱液;将洗脱液用乙醇沉淀,离心收集沉淀,干燥后,即得低分子量硫酸软骨素晶体。 | ||
搜索关键词: | 一种 分子量 硫酸 软骨素 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种低分子量硫酸软骨素的制备方法,其特征在于包括以下步骤:1)软骨预处理:将鲟鱼煮沸去除肌肉、脂肪等表面附着物,用石油醚浸泡后,用乙醇冲洗,烘干、粉碎得软骨颗粒;2)碱预处理:在软骨颗粒加入NaOH溶液,第一次搅拌后,用酸调节pH至中性,得软骨母液;3)酸和酶处理:在软骨母液中先加入苹果酸,调节pH至3.0~3.2,再加入胃蛋白酶,第二次搅拌,调节pH至5.0~5.5,然后加入木瓜蛋白酶和纤维素酶,第三次搅拌后,加入活性炭,第四次搅拌,过滤得澄清酶解液;4)过柱纯化:将步骤3)所得酶解液经树脂吸附,用NaCl溶液梯度洗脱,利用间苯三酚分光光度法检测,合并收集具有显色反应的洗脱液;5)沉淀干燥:将洗脱液用乙醇沉淀,离心收集沉淀,干燥后,即得低分子量硫酸软骨素晶体。
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