[发明专利]用于经控制DNA片段化的方法

摘要

本发明提供一种用于核酸的经控制活体外片段化的组合物和方法。转座酶与经修饰转座子末端形成催化活性复合物，所述经修饰转座子末端在其末端内含有序列简并、脱嘌呤/脱嘧啶位点、切口或核苷酸缺口，以在控制方法中片段化或剪切标靶核酸样品。此方法产生所需平均核酸片段尺寸。本发明组合物和方法可以应用于产生含有缩短转座子末端序列的DNA片段以促进随后反应、以便产生不对称带尾DNA片段等。

主权项

一种用于经控制DNA片段化的活体外方法，所述方法包含(a)使形成包含以下的转座体复合物的转座子和转座酶与标靶DNA接触，第一转座子，其具有可经所述转座酶识别的第一转座子核苷酸末端序列，和第二转座子，其具有可经所述转座酶识别的第二转座子核苷酸末端序列，形成反应混合物，其中所述第一转座子末端序列、所述第二转座子末端序列或所述第一转座子末端序列和所述第二转座子末端序列包含选自由以下组成的群组的经修饰序列：简并序列、脱嘌呤位点、脱嘧啶位点、切口、核苷酸缺口，以及其组合；和b)在用于转座反应的条件下培育所述反应混合物，产生标靶DNA片段，和将所述第一转座子末端序列、所述第二转座子末端序列、或所述第一转座子末端序列和所述第二转座子末端序列并入到所述标靶DNA的至少一个5′端中，其中相对于未经修饰的转座子末端序列，转座酶对含有所述修饰的所述第一、第二或第一和第二转座子末端序列的亲和力降低，产生经控制DNA片段化。