[发明专利]用于使用N-末端截短的β-半乳糖苷-α-2,6-唾液酸转移酶变体的糖蛋白的单-和二唾液酸化的方法

摘要

本公开涉及具有N-末端截短缺失的某些糖基转移酶变体的用途。发现人β-半乳糖苷-α-2,6-唾液酸转移酶I(hST6Gal-I)的两种不同的截短变体的组合表现出不同的唾液酸转移酶比活性。在一个例子中，在其中第一变体∆89 hST6Gal-I催化双唾液酸化目标分子的形成的条件下，第二变体∆108 hST6Gal-I催化单唾液酸化目标分子的形成。因此，公开了哺乳动物糖基转移酶的变体，编码其的核酸，用于重组产生哺乳动物糖基转移酶的变体的方法和方式及其用途，特别是用于以定量受控方式唾液酸化作为糖蛋白诸如免疫球蛋白的部分的聚糖部分的末端受体基团的用途。

主权项

一种组合物，其包含允许糖基转移酶活性的水性缓冲液，所述组合物进一步包含：(a) 糖基化的目标分子，所述目标分子选自糖蛋白和糖脂，所述目标分子包含多个触角，所述触角中的至少两个各自具有作为末端结构的在半乳糖基残基中的C6位置具有羟基的β‑D‑半乳糖基‑1,4‑N‑乙酰基‑β‑D‑葡糖胺部分；(b) SEQ ID NO:2的N‑末端截短的人β‑半乳糖苷‑α‑2,6‑唾液酸转移酶I (Δ89 hST6Gal‑I)；(c) SEQ ID NO:3的N‑末端截短的人β‑半乳糖苷‑α‑2,6‑唾液酸转移酶I (Δ108 hST6Gal‑I)；(d) 作为唾液酸转移酶催化的反应的供体化合物的胞苷‑5’‑单磷酸‑N‑乙酰神经氨酸。