[发明专利]一种叶酸靶向99mTc标记的锰基螯合物MR/SPECT双模态探针的制备方法

摘要

本发明涉及一种叶酸靶向99mTc标记的锰基螯合物MR/SPECT双模态探针的制备方法，将螯合试剂DOTA-NHS修饰到G5表面；将靶向分子FA连接到G5表面；将FI标记到G5上；利用DOTA配位螯合锰离子；利用乙酰化反应将G5表面氨基转化为乙酰基；最后，将放射核素99mTc标记到剩余的DOTA上，即得。本发明制备得到的分子影像探针在细胞水平和动物水平实现了MR/SPECT双模态成像，并且由于FA的介导，本发明制备得到的探针对FA受体高表达癌细胞株系Hela细胞肿瘤模型具有显著的靶向作用，可望实现癌症的双模态靶向诊断。

主权项

一种叶酸靶向99mTc标记的锰基螯合物MR/SPECT双模态探针的制备方法，包括：(1)分别将第五代聚酰胺‑胺树状大分子G5、螯合试剂DOTA‑NHS溶解在溶剂中，待分别完全溶解后，搅拌条件下将DOTA‑NHS溶液逐滴加入到G5溶液中，持续搅拌反应20‑24h，得到G5.NH2‑DOTA；其中G5和DOTA‑NHS二者之间的摩尔比为1：35～40；(2)将叶酸FA和EDC各自溶解在溶剂中，完全溶解后，将EDC溶液逐滴加入到FA溶液中，避光搅拌20‑30min，得到FA和EDC溶液；将NHS溶解在溶剂中，然后滴加到FA和EDC溶液中，避光搅拌2‑3h，得到活化后的FA溶液中，然后边搅拌边滴加入步骤(1)所得G5.NH2‑DOTA中，避光持续反应60‑72h，得到G5.NH2‑FA‑DOTA；(3)将异硫氰酸荧光素FI溶解在溶剂中，边搅拌边滴加到步骤(2)的G5.NH2‑FA‑DOTA中，避光持续反应20‑24h，得到G5.NH2‑FI‑FA‑DOTA；(4)将MnSO4.H2O溶解在超纯水中，边搅拌边滴加入步骤(3)体系中，避光持续搅拌20‑24h，得到G5.NH2‑FI‑FA‑DOTA‑Mn；(5)将三乙胺加入到步骤(4)反应体系中，避光持续搅拌反应20‑30min，然后再加入乙酸酐，避光持续搅拌反应20‑24h，透析，冷冻干燥，得到G5.NHAc‑FI‑FA‑DOTA‑Mn；(6)将G5.NHAc‑FI‑FA‑DOTA‑Mn溶解在缓冲液中，然后加入99mTc淋洗液、还原剂，将99mTc与DOTA螯合，分离纯化，得到G5.NHAc‑FI‑FA‑DOTA‑Mn‑99mTc，即为叶酸靶向99mTc标记的锰基螯合物MR/SPECT双模态探针。