[发明专利]一种油茶粕蛋白降血压肽间歇式制备方法有效
申请号: | 201410730822.5 | 申请日: | 2014-12-05 |
公开(公告)号: | CN104498571B | 公开(公告)日: | 2017-10-20 |
发明(设计)人: | 龚吉军;黄卫文;王挥;唐静;卢锟 | 申请(专利权)人: | 中南林业科技大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;A61P9/12 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205 | 代理人: | 张慧,宁星耀 |
地址: | 410004 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 一种油茶粕蛋白降血压肽间歇式制备方法,包括以下步骤(1)采用低变性度的油茶粕蛋白,配制质量浓度为3.0%‑6.0%的油茶粕蛋白溶液;(2)碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶的混合酶酶解;(3)中性蛋白酶与木瓜蛋白酶酶解;(4)酸性蛋白酶酶解,得粗酶解液;(5)闪蒸灭活;(6)静置,离心;(7)将上清液进行低温真空浓缩;(8)将上清液采用平衡渗析脱盐处理;(9)过超滤膜,收集滤液,冷冻干燥,即得。采用本发明,所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0wt%,蛋白回收率≥93.0wt%,ACE抑制率大于90.0%,对原发性高血压大鼠(SHR)具有显著的降血压效果。 | ||
搜索关键词: | 一种 油茶 蛋白 血压 间歇 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种油茶粕蛋白降血压肽间歇式制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)采用低变性度的油茶粕蛋白,其氮溶解指数达到90.0%‑98.0%,配制质量浓度为3.0%‑6.0%的油茶粕蛋白溶液; (2)用0.3‑0.7mol/L的NaOH调节油茶粕蛋白溶液的pH值至7.0‑10.0,控制温度为30‑60℃,加入相当于油茶粕中蛋白质量0.2%‑0.6%的复合蛋白酶I,所述复合蛋白酶I为碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶的混合酶,碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为3:3‑5:1‑3;酶解2‑4h,每间隔10‑30min用超声波处理器处理5‑15min,超声的频率为45‑65KHz,功率为50‑100W;(3)将温度调至40‑60℃,用0.6‑1.2mol/L的HCl将pH值调节至6.0‑8.0,向反应体系中加入相当于油茶粕中蛋白质量0.1%‑0.5%的复合蛋白酶Ⅱ,所述复合蛋白酶Ⅱ由中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合,中性蛋白酶与木瓜蛋白酶质量比为2‑5:3‑6,酶解1.5‑3.0h,每间隔10‑30min用超声波处理器处理5‑10min,超声的频率为45‑65KHz,功率为50‑80W;(4)将温度调至25‑45℃,用0.6‑1.2mol/L的HCl将pH值调节至1.5‑6.5,向反应体系中加入相当于油茶粕中蛋白质量0.1%‑0.5%的酸性蛋白酶,酶解2‑4h,每间隔20‑40min用超声波处理器处理5‑20min,超声的频率为45‑65KHz,功率为40‑70W,得粗酶解液;(5)将步骤(4)所得粗酶解液在120‑140℃下闪蒸2‑8S使蛋白酶灭活,用0.6‑1.2mol/L的HCl调节pH值至4.0‑5.0;(6)静置30min后,离心取上清液,用0.3‑0.7mol/L的NaOH溶液调节上清液pH值至中性;(7)将上清液进行低温真空浓缩,温度为45‑55℃,真空度为0.03‑0.05MPa,使上清液中多肽与盐的混合物总质量浓度控制在6‑12g/100mL;(8)将上清液采用平衡渗析脱盐处理,上清液与清水的体积流量控制在20‑60L/h,脱盐率≥99.0%;(9)过2kDa超滤膜,收集滤液,冷冻干燥,得到油茶粕蛋白降血压肽。
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