[发明专利]一种采用超滤法辅助双水相萃取技术提取乳过氧化物酶的方法有效
| 申请号： | 201410675881.7 | 申请日： | 2014-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN104450639B | 公开（公告）日： | 2017-11-28 |
| 发明（设计）人： | 姜瞻梅;许晓曦;刘丽丽;车红霞;付红岩 | 申请（专利权）人： | 东北农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司11139 | 代理人： | 孙皓晨,马鑫 |
| 地址： | 150030 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种采用超滤法辅助双水相萃取技术提取乳过氧化物酶的方法，本发明以牛乳清为原料，采用双水相萃取技术，使牛乳清中的乳过氧化物酶全部富集到盐相，盐相溶液经超滤膜去除小的杂蛋白，进一步纯化乳过氧化物酶，通过透析袋脱盐处理，然后冷冻干燥，从而制备出高活性的可用于天然食品添加剂的乳过氧化物酶产品。采用本发明的方法可以直接制得具有天然抗菌活性的乳过氧化物酶，可以将其作为天然防腐剂直接加入到食品或牙膏等日常用品中。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 采用 超滤 辅助 双水相 萃取 技术 提取 过氧化物 方法 | ||
【主权项】：
一种采用超滤法辅助双水相萃取技术提取乳过氧化物酶的方法，其特征包含以下步骤：(1)双水相萃取乳过氧化物酶：除去新鲜的牛乳中的脂肪和酪蛋白后得到乳清，在室温条件下，直接向乳清中连续添加聚乙二醇(PEG)和盐并将其置于搅拌器上不断搅拌，直至聚乙二醇和盐完全溶解于乳清中，其中聚乙二醇的分子量为6000Da，盐为MgSO4，以w/w计，聚乙二醇的终浓度为12‑16％，MgSO4的终浓度为10％‑14％，使用NaOH调节体系pH至8.0‑9.0，静止，待两相完全分离，收集体系的下相，即盐相部分；(2)超滤：将收集的盐相溶液，使用HCl调节pH至6.5‑7.5，用超滤膜进行超滤分离，以除去杂蛋白，收集截留溶液，进而达到浓缩纯化乳过氧化物酶的目的；(3)脱盐处理：将步骤(2)收集的截留溶液装入透析袋内进行脱盐；(4)干燥：将脱盐溶液冷冻干燥即制得乳过氧化物酶粗制品。
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