[发明专利]一种检测食品中金黄色葡萄球菌活细胞的试剂盒

摘要

本发明公开了快速准确检测食品中金黄色葡萄球菌活细胞的方法。本发明针对金黄色葡萄球菌高度保守序列设计和优化了一对特异性引物，采用荧光定量PCR对待测样品进行检测，确认待测样品是否被金黄色葡萄球菌污染。在进行qPCR检测前，本发明采用叠氮溴化丙锭对食品中金黄色葡萄球菌进行处理。本发明的有益效果主要体现在：检测特异性好，qPCR能对靶细菌进行定量检测；PMA的使用消除了检测的假阳性结果；避免了杂菌的干扰，可直接用于自然条件下食品样品的检测；可用于基层医疗卫生单位、食品企业和各疾病预防控制中心筛查和检测，具有较大的经济、社会效益。

主权项

一种运用PMA‑qPCR选择性检测食品中金黄色葡萄球菌活细胞的试剂盒，包括金黄色葡萄球菌阳性对照品、阴性对照品、DNA荧光染料、DNA聚合酶、PCR反应液和叠氮溴化丙锭（PMA）溶液的六个离心管，所述PCR反应液含有PCR缓冲液、dNTP，还含有金黄色葡萄球菌特异性上游引物、下游引物，所述引物序列如下：上游引物: 5’‑CGATTGATGGTGATACGGTT‑3’下游引物: 5’‑GCACTTGCTTCAGGACCAT‑3’；所述金黄色葡萄球菌阳性对照品为金黄色葡萄球菌重组质粒DNA标准品，序列如下：cgattgatggtgatacggttaaattaatgtacaaaggtca aacaatgacattcagactattattggttgatacacctgaaacaaagcatcctaaaaaaggtgtagagaaatatggtcctgaagcaagtgc。