[发明专利]利用幼嫩子房对烟草单个植株进行染色体制片的方法

摘要

本发明公开了利用幼嫩子房对烟草单个植株进行染色体制片的方法，其包括如下步骤：(1)取材；(2)预处理及固定；(3)后续采用直接涂片、酶解后压片和涂片方法得烟草染色体制片。本方法选取烟草幼嫩子房为材料，进行染色体制片，由于烟草花量大，且花期长，有大量材料备选。可获得的较多分裂相，部分分裂相染色体形态良好，适于进行核型分析及染色体原位杂交等后续试验分析过程。本方法克服了利用烟草根尖制片时材料细小和材料稀少的缺点，尤其适用于对单个烟草植株进行染色体制片。

主权项

利用幼嫩子房对烟草单个植株进行染色体制片的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)取材：于花期内进行取材，取材时间为晴朗早上8:00‑9:00之间，取材对象为幼小花蕾，以小孢子母细胞减数分裂期花蕾为佳，因不同材料花蕾大小存在差异；(2)预处理及固定：用镊子将花蕾取下，去掉花柄后放入装有蒸馏水的小玻璃管中，轻轻振荡使花蕾浸入溶液中，快速置于4℃冰箱中放置18‑24h(温度及时间可根据染色体形态自行调节)，吸出蒸馏水，加入卡洛氏固定液(甲醇：冰醋酸＝3:1)，固定过夜；(3)后续采用直接涂片、酶解后压片或涂片方法得烟草染色体制片；任选地，压片后直接观察，获得良好中期分裂相，如需后续试验和长期保存，可采用常规方法揭片；直接涂片和酶解后涂片还包括染色步骤:用5％吉姆萨溶液进行染色,染色体时间控制在30秒至1分钟之间。