[发明专利]将引物或引物、探针固定于固相载具用于PCR的方法

摘要

本发明涉及PCR反应（聚合酶链式反应）实验技术领域，尤其是一种将引物或引物、探针固定于固相载具用于PCR的方法。将引物或引物、探针按相关主题，溶解好以后，按一定的比例，在无菌实验室里加入到固相载具的PCR反应管（孔）内，然后放入烘箱中，将加入的液体水分蒸干，同时保留并贴壁固定引物或引物、探针，即形成固化的引物或引物、探针反应层，最后用膜将固相载具密闭，4℃保存，以待备用。本发明的固相载具带有引物层或引物、探针混合层，使用时只需加入酶混合液、灭菌水和模板，不需再加入PCR引物和探针，降低了加孔出错率；能很快完成实验操作，缩短检测周期；PCR反应的引物、探针已固定在PCR管内，运输与储存非常方便。

主权项

一种将引物或引物、探针固定于固相载具用于PCR的方法，其方法如下：步骤一、引物或引物、探针按相关主题溶解：引物、探针合成后，按引物、探针终浓度100uM 的需要量，加入缓冲液，短暂离心使加入的缓冲液全部沉积到PCR管（孔）底部，保证引物、探针充分溶解到缓冲液中，室温放置1h，形成母液；步骤二、在无菌实验室里，将上下游引物分别从步骤一的100uM母液中取出10ul分装，再加入10‑90ul 缓冲液稀释到10‑50uM，形成使用液，4℃保存备用，根据进行的单重或者多重PCR反应需要，将该使用液加入固相载具的PCR反应管（孔）中；其特征是：步骤三、将已加入引物或引物、探针的固相载具放入烘箱中，直至将加入的液体水分蒸干，加入的引物或引物、探针即被贴壁固定，此时即形成固化的引物层或引物、探针层；步骤四、将带有固化的引物层或引物、探针层的固相载具用膜封板，4℃保存，以待备用。