[发明专利]一种库尔勒香梨果实细胞切片立体染色方法

摘要

本专利发明了一种库尔勒香梨细胞切片立体染色方法，其特征是将5%苏木精无水乙醇溶液、10%三氯化铁溶液、碘‑碘化钾溶液和30%过氧化氢溶液按照一定的比例混合后对库尔勒香梨果实细胞切片进行染色，将细胞壁染成褐色，细胞核染成紫黑色，石细胞染成淡黄色至褐色，输导组织染成淡褐色，各部位细胞清楚可见、区分明显，实现了立体染色效果。解决了传统染色方法染色时间不易把握，石细胞和输导组织细胞模糊不清楚，果肉细胞边界不明显的缺陷。可应用于库尔勒香梨果实生长发育各时期细胞的研究。本专利发明试验方法操作简单，节约时间；节省材料，不用盖玻片就能观察；也可经二甲苯处理后制作成永久切片，用于科研教学领域。

主权项

1.一种库尔勒香梨果实细胞切片立体染色法，其特征是将2天前配制好的苏木精溶液、10％三氯化铁溶液和碘-碘化钾溶液按3：4：2的体积比例混合均匀，半个小时后对处理好的库尔勒香梨果实细胞切片染色，染色时间20-30分钟，再经分化、脱水处理后拍片观察，也可经二甲苯处理后制作成永久切片；/n所述苏木精溶液由5％苏木精无水乙醇溶液和30％过氧化氢溶液按照10:1体积比例配制得到；/n所述库尔勒香梨果实细胞切片，由用常规石蜡切片法将库尔勒香梨果肉组织切成12-14um厚，经二甲苯脱蜡10分钟→1/2二甲苯+1/2乙醇浸泡5分钟→无水乙醇浸泡3分钟→95％乙醇浸泡3分钟→90％乙醇浸泡3分钟→80％乙醇浸泡3分钟→70％乙醇浸泡3分钟→50％乙醇浸泡3分钟→30％乙醇浸泡3分钟→蒸馏水浸泡1分钟得到；/n所述脱水，为用90％乙醇急速分化1分钟，然后经95％乙醇浸泡1分钟、无水乙醇浸泡1分钟；/n所述的碘-碘化钾溶液，是将4g碘化钾溶解到热蒸馏水100ml中，碘化钾充分溶解后加入碘1.5g。/n