[发明专利]一种库尔勒香梨果实细胞切片立体染色方法有效
| 申请号: | 201410537088.0 | 申请日: | 2014-10-13 |
| 公开(公告)号: | CN105571920B | 公开(公告)日: | 2020-01-17 |
| 发明(设计)人: | 李疆;李鹏;罗淑萍 | 申请(专利权)人: | 新疆农业大学 |
| 主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 830052 新疆维吾尔自*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 库尔勒 梨果 细胞 切片 立体 染色 方法 | ||
1.一种库尔勒香梨果实细胞切片立体染色法,其特征是将2天前配制好的苏木精溶液、10%三氯化铁溶液和碘-碘化钾溶液按3:4:2的体积比例混合均匀,半个小时后对处理好的库尔勒香梨果实细胞切片染色,染色时间20-30分钟,再经分化、脱水处理后拍片观察,也可经二甲苯处理后制作成永久切片;
所述苏木精溶液由5%苏木精无水乙醇溶液和30%过氧化氢溶液按照10:1体积比例配制得到;
所述库尔勒香梨果实细胞切片,由用常规石蜡切片法将库尔勒香梨果肉组织切成12-14um厚,经二甲苯脱蜡10分钟→1/2二甲苯+1/2乙醇浸泡5分钟→无水乙醇浸泡3分钟→95%乙醇浸泡3分钟→90%乙醇浸泡3分钟→80%乙醇浸泡3分钟→70%乙醇浸泡3分钟→50%乙醇浸泡3分钟→30%乙醇浸泡3分钟→蒸馏水浸泡1分钟得到;
所述脱水,为用90%乙醇急速分化1分钟,然后经95%乙醇浸泡1分钟、无水乙醇浸泡1分钟;
所述的碘-碘化钾溶液,是将4g碘化钾溶解到热蒸馏水100ml中,碘化钾充分溶解后加入碘1.5g。
2.如权利要求1所述一种库尔勒香梨果实细胞切片立体染色法,其特征在于,所述分化:根据染色程度,用1%三氯化铁水溶液浸泡30s-1min,至石细胞为淡黄色,用自来水充分洗去三氯化铁溶液,再用蒸馏水浸泡1分钟。
3.如权利要求1所述一种库尔勒香梨果实细胞切片立体染色法,其特征在于,所述的二甲苯处理:1/2乙醇+1/2二甲苯浸泡3分钟→二甲苯浸泡5分钟→二甲苯浸泡5分钟→中性树胶封片,制作成永久切片。
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