[发明专利]一种基因工程木聚糖酶及其制备与应用

摘要

本发明公开了一种基因工程木聚糖酶，其是木聚糖酶CbX的N末端截去了信号肽后的突变体，同时实现了木聚糖酶基因在异源宿主细胞内的高效表达。本发明进一步对该木聚糖酶进行改造，截去了C端的碳水化合物结合结构域，并在C末端引入二硫键，构建的木聚糖酶蛋白突变体的分子量更小，热稳定性提高，比活力也大大提高。通过以上方式，使该木聚糖酶及其突变体更有潜力应用于工业生产。

主权项

1.一种基因工程木聚糖酶，其特征在于，将完整木聚糖酶CbX的N末端信号肽去除，即将蛋白序列如SEQ ID NO:2所示的序列的第1‑27位氨基酸去除，产生蛋白序列如SEQ ID NO:4所示的CbX酶；再将CbX酶截去了C端的碳水化合物结合结构域以及连接肽，即将蛋白序列如SEQ ID NO:4所示的序列的213‑330位和201‑212位截去，产生蛋白序列如SEQ ID NO:8所示的截短突变体CbX‑CD；之后在C末端引入形成二硫键相互作用的突变，即在蛋白序列如SEQ ID NO:8所示的序列的第69位和第194位氨基酸进行突变，获得的基因序列为SEQ ID NO:9、蛋白序列为SEQ ID NO:10的突变体CbX‑CDS1。