[发明专利]一种双水相体系分离富集牡丹花色苷的方法

摘要

本发明属于天然产物有效成分的分离纯化领域，特别公开了一种双水相体系分离富集牡丹花色苷的方法。本发明将牡丹鲜花低温烘干粉碎，加入由乙醇和硫酸铵构成的双水相体系，并添加蔗糖和有机酸作为花色苷的稳定剂，冰水浴条件下进行磁力搅拌，离心得上相、下相以及牡丹花残渣，进一步对残渣和下相进行多次萃取，然后合并上相进行醇沉除杂和萃取除杂，真空浓缩得牡丹花色苷。本发明采用双水相体系条件温和，提取时间短，有机相易回收，提取成本低，易于工业化放大生产。

主权项

一种双水相分离富集牡丹花色苷的方法，以牡丹鲜花为原料，其特征为，包括如下步骤：（1）将牡丹鲜花于35‑40℃下低温烘干至恒重，粉碎至40‑60目，得到牡丹花干粉；（2）将硫酸铵溶于蒸馏水中，然后添加无水乙醇，充分震荡混匀，构成双水相体系，无水乙醇和蒸馏水的体积比为1:1.5‑2.5，硫酸铵在双水相体系中的质量分数为10‑14%；（3）在双水相体系中添加牡丹花干粉、蔗糖和有机酸，调节pH为3‑4，在冰水浴条件下进行磁力搅拌，冷冻离心，得到上相、下相以及牡丹花残渣，取牡丹花残渣置于双水相体系中，重复上述提取步骤；有机酸的浓度为0.05‑0.1mol/mL，有机酸为丙二酸、单宁酸和草酸中的一种或多种；（4）取分离所得的下相溶液和牡丹花残渣，分次添加无水乙醇进行多级萃取，调节pH为3‑4，在冰水浴条件下进行磁力搅拌，离心，合并多级萃取和首次萃取所得的上相溶液；（5）在上相溶液中添加5倍体积的无水乙醇，0‑4℃避光静置24h，过滤，醇沉除去蔗糖以及残留在上相中的杂质；（6）真空浓缩除去上相中的乙醇，用蒸馏水对固形物进行分散，用乙醇和正丁醇的混合溶液对牡丹花色苷进行萃取，最后得到产品。