[发明专利]无血清培养基及其用途和一种猪瘟病毒的培养方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及兽用生物制品工程技术领域，更为具体的说是涉及无血清培养及其用途和应用这些培养基的猪瘟病毒的培养方法。本发明以MEM为基础培养基，通过对猪睾丸细胞以及猪瘟病毒的生长、增殖特征研究，利用在基础培养基内添加不同成分，分别得到一系列的猪睾丸细胞无血清培养基、以及不同生长阶段的猪瘟病毒增殖无血清培养基，从而既避免了BVDV及其抗体可能产生的污染风险，同时可以实现ST细胞贴壁生长，且生长迅速、细胞面完整，个体饱满，可以长期传代培养。

主权项

适用于微载体悬浮培养的无血清培养基，其特征在于：所述无血清培养基为pH为7.0~7.5的水溶液，其组分如下：MEM基础培养基9.8g/L；丙酮酸钠50～200mg/L；大豆蛋白水解物0.5～2g/L；胆固醇2～6mg/L；碱性成纤维细胞生长因子15～50mg/L；抑制素B 15～50mg/L；胰岛素15～50mg/L；L‑丙氨酸10～30mg/L；L‑缬氨酸100～200mg/L；L‑亮氨酸10～80mg/L；L‑异亮氨酸25～100mg/L；L‑甲硫氨酸100～200mg/L；L‑脯氨酸100～200mg/L；L‑苯丙氨酸100～200mg/L；L‑色氨酸15～100mg/L；L‑甘氨酸0～30mg/L；L‑丝氨酸10～100mg/L；L‑苏氨酸10～100mg/L；L‑半胱氨酸10～100mg/L；L‑天冬酰胺10～100mg/L；L‑谷氨酰胺200～300mg/L；L‑酪氨酸10～100mg/L；L‑天冬氨酸10～30mg/L；L‑谷氨酸10～100mg/L；L‑赖氨酸10～100mg/L；L‑精氨酸10～100mg/L；L‑组氨酸10～100mg/L；羟脯氨酸10～100mg/L；豆蔻酸0.05～0.3mg/L；棕榈酸0.05～0.3mg/L；棕榈油酸0.05～0.3mg/L；硬脂酸0.05～0.3mg/L；精胺0.1～0.3ml/L；亚精胺0.1～0.3ml/L；还原型谷胱甘肽1～3mg/L；乙醇胺1～3ml/L；β‑巯基乙醇0.5～2ml/L；甘油0.5～2g/L；生物素0.01～0.1mg/L；吡哆醇1～3mg/L；抗坏血酸0.5～3mg/L；维生素B‑12 0.5～2mg/L；次黄嘌呤3～20mg/L；胸苷0.01～0.1mg/L；NaHCO3 1～1.5g/L；FeSO47H2O 5～20mg/L；ZnSO4 15～40mg/L；Na2SeO3 0.1～0.5mg/L；柠檬酸铁 2～20mg/L。