[发明专利]一种通过体外酶消化法评定豆粕家禽有效氨基酸含量的方法

摘要

本发明涉及一种通过体外酶消化法评定豆粕家禽有效氨基酸含量的方法；首先分析测定豆粕样品中氨基酸含量(AA_i)，利用两步酶法(胃蛋白酶—胰酶)体外消化豆粕，通过豆粕样品中氨基酸含量×体外干物质消失率(AA_i×DMD)与其对应的家禽有效氨基酸含量(EAA_i)的实测值进行回归分析，建立待测豆粕样品中各种氨基酸含量、体外干物质消失率与有效氨基酸含量的数学模型，用于快速评定豆粕家禽有效氨基酸含量。本发明可以快速评定豆粕家禽有效氨基酸含量且适于生产应用，为更精确地配制家禽饲料提供保障。

主权项

一种通过体外酶消化法评定豆粕家禽有效氨基酸含量的方法，其特征在于包括以下步骤：1)将待测豆粕样品粉碎，过60目筛，105±2℃烘至恒重，按GB/T 18246方法测定其各种氨基酸含量AA_i；准确称取待测豆粕样品M₀1.0g，，加入浓度为1.0mg/mL的胃蛋白酶水溶液10～15mL(pH＝1.5～3.5)，密封，36～42℃水浴恒温振荡120～180r/min消化4小时；再向上述消化4小时后的样品中加入浓度为1.0mol/L NaOH溶液0.1～0.3mL中和；然后再向上述中和后的样品中加入浓度为10mg/mL的胰酶水溶液10～15mL，混合均匀后转移到12000～14000D的透析袋中，封口；将透析袋放入300～500mL pH＝6.5～8.5的磷酸缓冲液中，36～42℃水浴恒温振荡120～180r/min消化20小时；取出透析袋，用蒸馏水反复冲洗透析袋内消化残渣，105℃烘干，测定残渣的质量M₁，通过以下公式计算待测豆粕样品的体外干物质消失率DMD：$\mathrm{DMD}=\frac{M_0\left(g\right)-M_1\left(g\right)}{M_0\left(g\right)}$其中，DMD为待测豆粕样品的体外干物质消失率；M₀为待测豆粕样品体外消化前的质量，单位g；M₁为残渣的质量即待测豆粕样品体外消化后的质量，单位g；2)将待测豆粕样品的氨基酸含量×体外干物质消失率AA_i×DMD代入下述构建的数学模型，得出待测豆粕的各种有效氨基酸含量；建立的待测豆粕样品中各种家禽有效氨基酸含量EAA_i评定的数学模型如下：赖氨酸(Lys)：EAA_Lys＝1.2015×(AA_Lys×DMD)+0.0586蛋氨酸(Met)：EAA_Met＝1.2900×(AA_Met×DMD)‑0.0173苏氨酸(Thr)：EAA_Thr＝1.1614×(AA_Thr×DMD)+0.0303色氨酸(Tyr)：EAA_Tyr＝1.4006×(AA_Tyr×DMD)‑0.4772精氨酸(Arg)：EAA_Arg＝1.2015×(AA_Arg×DMD)+0.1839丝氨酸(Ser)：EAA_Ser＝1.1400×(AA_Ser×DMD)+0.1236谷氨酸(Glu)：EAA_Glu＝1.1820×(AA_Glu×DMD)+0.5250甘氨酸(Gly)：EAA_Gly＝1.1044×(AA_Gly×DMD)+0.2311丙氨酸(Ala)：EAA_Ala＝1.1862×(AA_Ala×DMD)+0.0058胱氨酸(Cys)：EAA_Cys＝1.5282×(AA_Cys×DMD)‑0.1705缬氨酸(Val)：EAA_Val＝0.9617×(AA_Val×DMD)+0.2812亮氨酸(Leu)：EAA_Leu＝1.2580×(AA_Leu×DMD)‑0.0552组氨酸(His)：EAA_His＝0.9943×(AA_His×DMD)+0.2318脯氨酸(Pro)：EAA_Pro＝1.2707×(AA_Pro×DMD)+0.0072天冬氨酸(Asp)：EAA_Asp＝1.1783×(AA_Asp×DMD)+0.2705异亮氨酸(Ile)：EAA_Ile＝1.2502×(AA_Ile×DMD)‑0.0618苯丙氨酸(Phe)：EAA_Phe＝1.2708×(AA_Phe×DMD)+0.0095所述的i是指赖氨酸Lys、蛋氨酸Met、苏氨酸Thr、色氨酸Tyr、精氨Arg、丝氨酸Ser、谷氨酸Glu、甘氨酸Gly、丙氨酸Ala、胱氨酸Cys、缬氨酸Val、亮氨酸Leu、组氨酸His、脯氨酸Pro、天冬氨酸Asp、异亮氨酸Ile或苯丙氨酸Phe。