[发明专利]一种从阿胶中提取DNA的方法

摘要

本发明提供了一种从阿胶中提取DNA的方法，由于阿胶本身属于蛋白质成分高，且粘性大的物质，使DNA提取不易，而且阿胶在制作过程中，原料经反复熬煮，致使DNA部分遭到破坏，更增加了阿胶DNA提取的难度，本发明方法规定了蛋白酶K作用的最佳时间、最佳用量，使用十二烷基硫酸钠消化，平衡酚、氯仿、异戊醇抽提，使用96％乙醇与乙酸钾析出DNA，最后用乙醇洗涤、干燥，采用该方法可成功提取高质量的阿胶DNA，可应用于阿胶分子鉴定，该方法简单、经济、易于操作。

主权项

一种从阿胶中提取DNA的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)向200mg粉碎后的阿胶中加入0.9～1.1mL SDS提取/裂解缓冲液并搅拌均匀得混合液A，向混合液A中加入95～105mg/mL的蛋白酶K水溶液后混合均匀得混合液B，加入的蛋白酶K水溶液与SDS提取/裂解缓冲液的体积比为0.9～1.1:20；将混合液B于67.5～68.5℃温浴1.4～1.6h得混合液C；2)向混合液C中加入0.9～1.1倍混合液C体积的平衡酚后颠倒混匀，然后离心，收集离心得到的上层水相得料液A1；向料液A1中加入0.9～1.1倍料液A1体积的平衡酚后颠倒混匀，然后离心，收集离心得到的上层水相得料液A2；3)向料液A2中加入0.9～1.1倍料液A2体积的溶剂A后颠倒混匀，然后离心，收集离心得到的上层水相得料液B1；向料液B1中加入0.9～1.1倍料液B1体积的溶剂A后颠倒混匀，然后离心，收集离心得到的上层水相得料液B2；向料液B2中加入0.9～1.1倍料液B2体积的溶剂A后颠倒混匀，然后离心，收集离心得到的上层水相得料液B3，溶剂A为平衡酚与氯仿的混合物，溶剂A中平衡酚：氯仿的体积比为25:24；4)向料液B3中加入0.9～1.1倍料液B3体积的溶剂B后颠倒混匀，然后离心，收集离心得到的上层水相得料液C1，溶剂B为氯仿与异戊醇的混合物，溶剂B中氯仿：异戊醇的体积比为24:1；5)利用乙醇沉淀法处理料液C1，使料液C1中的DNA沉淀，然后依次经过分离、洗涤以及干燥获得DNA。