[发明专利]DNA分离纯化方法及其试剂盒有效
申请号: | 201410377744.5 | 申请日: | 2014-08-01 |
公开(公告)号: | CN104152436B | 公开(公告)日: | 2017-12-15 |
发明(设计)人: | 徐小寅;蒋锦琴;隋梅花;徐万红 | 申请(专利权)人: | 杭州新景生物试剂开发有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙)11411 | 代理人: | 武金花 |
地址: | 310030 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提出了一种DNA分离纯化方法及其试剂盒,方法包括下列步骤(a)将裂解缓冲液加入到含有DNA的生物样本中以得到溶解的生物样本缓冲溶液;然后剧烈摇晃缓冲溶液;(b)在剧烈摇晃后的所述缓冲溶液中加入沉淀液,之后剧烈摇晃,离心,形成蛋白质沉淀和上清液;(c)将所述的上清液加入纯化柱中,洗脱DNA。使用本发明的DNA分离纯化方法样本溶解,血红蛋白沉淀,柱纯化,洗脱DNA,小于15分钟。无需另外添加乙醇,或者调整pH,盐分等条件,DNA就可以吸附到纯化柱上。 | ||
搜索关键词: | dna 分离 纯化 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种DNA分离纯化方法,所述方法包括下列步骤:(a)将裂解缓冲液加入到含有DNA的生物样本中以得到溶解的生物样本缓冲溶液;然后剧烈摇晃缓冲溶液;(b)在剧烈摇晃后的所述缓冲溶液中加入沉淀液,之后剧烈摇晃,离心,形成蛋白质沉淀和上清液;(c)将所述的上清液加入纯化柱中,洗脱DNA;所述裂解缓冲液由1‑2M氯化铵、1.5‑2.5M硫氰酸铵、3.5‑5M硫氰酸胍、0.1%‑1%g/g磷酸二氢钠、1%‑5%g/g磷酸氢二钠、1%‑5%g/g十二烷基肌氨酸钠组成;所述沉淀液由5%‑10%g/g乙酸钠或乙酸钾、2%‑10%g/g乙酸、10%‑50%g/g硫酸锌、1‑2M氯化钾以及1‑2M盐酸胍组成;所述裂解缓冲液、样本、沉淀液的体积比是3∶4∶3。
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