[发明专利]细柱五加的离体快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种细柱五加快速繁殖方法，进行规模化生产和繁殖以满足市场需要细柱五加组织培养步骤包括：A.外殖体消毒，B.无菌苗获得，C.腋芽生长培养，D.丛生芽诱导，E.生根培养，F 炼苗与移栽。采用植物组织培养的方法繁殖细柱五加，不仅不受外界条件的影响，四季皆可进行，节约苗木占地，降低生产成本，而且可以保存母体的全部优良性状，遗传性状稳定。这种方法可在短时间内形成大量的优良试管苗，进行规模化、工厂化生产，为观赏园艺、制药等产业提供大量的原材料。

主权项

细柱五加的离体快速繁殖方法，其特征在于：A外殖体消毒：选取腋芽饱满且尚未萌发的嫩枝，摘去叶片，然后将枝条剪为约2cm的小段，每段带一对腋芽，采用多方式消毒漂洗后，用无菌水冲洗4～6遍，最后用无菌滤纸吸干表面水分；B腋芽诱导：将消毒好的细柱五加茎段切成1.0‑1.5cm的带芽节段，接种到以下培养基中：WPM基本培养基，蔗糖20～40g/L，植物生长激素0.2～2.0mg/L，适当pH值下进行光照培养；C腋芽培养：将腋芽萌发后培养20天左右的无菌苗茎尖用剪刀剪下，接种到以下培养基中：WPM基本培养基，蔗糖20～40g/L，植物生长激素0.2～2.0mg/L，适当pH值下进行光照培养；D丛生芽诱导：将生长至8cm左右的芽苗切下，分成带有一对腋芽的小段：WPM基本培养基，植物生长激素0.5～1.0mg/L，进行光照培养30～40天；E生根培养：选取健壮的试管苗，经过修剪后，在含植物生长激素400～500mg/L浸泡10‑15min后接种到如下培养基中：1/2WPM或WPM基本培养基，蔗糖20～40g/L，进行光照培养50～60天。F炼苗移栽：将组培瓶盖打开，并添加一定量蒸馏水进行有菌条件驯化一段时间；用镊子将组培苗从瓶中取出，移栽到已经灭菌的栽培基质中，进行遮阴驯化3周，期间不定期的喷施1/2WPM营养液。