[发明专利]一种半乳糖配体分子的酶促合成方法

摘要

本发明涉及一种半乳糖配体分子的酶促合成方法。本发明首次采用生物酶催化合成这一配体分子，酶促合成法能够克服以往化学法在合成类似半乳糖配体分子过程中的不足，具有高效、高选择性、高产率和低毒等优势。本发明方法制备得到的半乳糖配体分子是一种可修饰脂质体的载体原料，包载药物形成肝靶向脂质体复合物，从而实现半乳糖配体分子介导相关药物靶向到肝细胞，降低其对正常组织的毒性，提高药物的肝病防治效果。

主权项

一种半乳糖配体分子的合成方法，其特征在于：所述方法是在酶的催化条件下，酯化而合成，具体包括以下步骤：步骤1：固醇基连接碳桥步骤：将一定量的二乙烯酯、固醇ROH在脱水有机溶剂中溶解后，加入适量酶催化剂，温度35℃～55℃，反应0～48h后，过滤，滤液浓缩挥去有机溶剂，浓缩液重结晶即得中间产物式II；反应表示为：其中n＝0～99；其中ROH为固醇，R为固醇基，R选自以下5种基团的至少一种：其中，固醇与二乙烯酯的投料摩尔比为1∶1～20∶1；其中，所述的脱水有机溶剂为异辛烷、正己烷、环己烷、石油醚、丙酮其中至少一种或任意几种的组合；其中所采用的酶催化剂为选自RCL、Chirazyme L‑2脂肪酶、Chirazyme L一1脂肪酶及Lipase QLM中的一种；步骤2：半乳糖基连接碳桥步骤：将步骤1得到的中间产物式II与乳糖醇或半乳糖或乳糖R’OH在脱水有机溶剂中溶解后，加入适量的另一种酶催化剂和适量的分子筛，置于恒温20～60℃，反应0.5～48h，抽滤，滤液真空低温浓缩挥去有机溶剂，浓缩液层析纯化，得到半乳糖配体分子式I，上述反应过程表示如下：其中R’OH为乳糖醇、半乳糖或乳糖，R’为半乳糖基，反应位点为C‑6位，R’选自以下结构中的一种：其中，步骤1得到的中间产物式II与R’OH的投料摩尔比为1∶1～20∶1；其中，所选的为南极假丝酵母脂肪酶B，或者其商品化固定酶Novozym435；其中，所用反应溶剂选自吡啶、吡啶+丙酮、吡啶+THF、吡啶+叔戊醇、吡啶+乙二醇二甲醚、吡啶+DMF及吡啶+DMSO中的一种。