[发明专利]一种提高鸡骨骼肌细胞氧化代谢能力的培养方法有效

专利信息
申请号: 201410273222.0 申请日: 2014-06-18
公开(公告)号: CN104059876A 公开(公告)日: 2014-09-24
发明(设计)人: 张宇;李海;刘忠华;连正兴 申请(专利权)人: 东北农业大学
主分类号: C12N5/073 分类号: C12N5/073
代理公司: 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 代理人: 何自刚
地址: 150030 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 发明公开了一种提高鸡骨骼肌细胞氧化代谢能力的培养方法,属于生物技术领域。本发明所提供的方法是将经过分离、纯化的鸡骨骼肌成肌细胞和肌源成纤维细胞分别接种于Transwell培养皿的上室和下室,二者以1μm孔径的PET膜分开但共享添加有H2O2的成肌分化培养基;经过成肌分化诱导培养7-10天获得具有自主收缩能力的肌管,期间每隔8-12小时进行1次低温冲击刺激。本发明提供的方法能够显著提高鸡骨骼肌细胞的线粒体含量及其跨膜电位和有氧代谢酶的活性,同时降低了ATPase的活性。该方法具有培养周期短、效果稳定的特点,为研究鸡骨骼肌能量代谢规律、纤维类型形成机制等奠定了基础,具有良好的研究及应用价值。
搜索关键词: 一种 提高 骨骼肌 细胞 氧化 代谢 能力 培养 方法
【主权项】:
一种提高鸡骨骼肌细胞氧化代谢能力的培养方法,其特征在于,从鸡胚胎中分离纯化鸡骨骼肌成肌细胞和肌源成纤维细胞,将成肌细胞接种于Transwell Insert的PET膜上进行增殖培养,同时将肌源成纤维细胞经过传代培养后接种于Transwell Insert培养皿上培养,再将经过增殖培养的成肌细胞转接入含有肌源成纤维细胞的Transwell Insert培养皿中,然后加入含有H2O2的分化培养基进行分化培养。
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