[发明专利]一种肝病辅食型鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种肝病辅食型鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备方法，本发明包括以下步骤：（1）鳕鱼皮预处理；（2）酶解反应：加入胰蛋白酶酶解反应；（3）超滤得GM2组分；（4）DEAE‑Sepharose FF离子交换层析分离得到GM2‑2组分；（5）Sephadex G‑25层析分离得GM2‑2‑3组分，冷冻干燥后得到肝病辅食型胶原蛋白肽。本发明以水产加工副产物鳕鱼皮为原料，从中提取具有肝细胞修复作用的胶原蛋白肽，简单易行，生产成本低，可以显著提高水产加工副产品的价值，避免浪费的同时还保护了环境，还能为开发相关功能性食品提供前期基础。

主权项

一种肝病辅食型鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）鳕鱼皮预处理：将鳕鱼皮洗净后用4℃纯水浸泡20‑30min，后用浓度0.1‑0.2mol/L NaOH 浸泡 6‑8小时，用清水冲洗至 pH=7，沥干水分后，用浓度0.1‑0.2mol/L的冰醋酸溶胀10‑12小时，最后用剪刀剪碎；（2）酶解反应：将步骤（1）预处理后的鳕鱼皮与水按照1:4（w/v）的料液比混合，然后加入胰蛋白酶酶解反应，酶解条件为：胰蛋白酶用量为每g鳕鱼皮加入2000U，酶解温度50℃，pH 6，时间8h；（3）超滤：步骤（2）酶解反应结束后，灭酶，离心，收集上清液，上清液用超滤膜超滤，截留获得分子量为5‑10KDa的组分，冷冻干燥后得GM2组分；（4）DEAE‑Sepharose FF离子交换层析分离：将GM2组分上DEAE‑Sepharose FF离子交换柱，采用pH4.5的醋酸‑醋酸钠缓冲液作为洗脱剂洗脱，收集洗脱液，冷冻干燥后得到GM2‑2组分；（5）Sephadex G‑25层析分离：将GM2‑2组分经Sephadex G‑25凝胶柱洗脱后，从上样开始计时，收集90‑100min时间段洗脱液获得GM2‑2‑3组分，冷冻干燥后得到肝病辅食型胶原蛋白肽。