[发明专利]一种单只轮虫基因组DNA的快速提取方法无效
申请号: | 201410177155.2 | 申请日: | 2014-04-29 |
公开(公告)号: | CN103937782A | 公开(公告)日: | 2014-07-23 |
发明(设计)人: | 乔之怡;霍达;罗阳;张俊;刘瑞;孙婧;聂云思 | 申请(专利权)人: | 天津农学院;海河流域水环境监测中心 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 王融生 |
地址: | 300384 天津市西*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 一种单只轮虫基因组DNA的快速提取方法,使用裂解液:25mMNaOH,0.2mMEDTA和缓冲液:40mMTris-HCL,pH5.0的两种试剂,操作过程为:自然水体中获取的轮虫经清洗、饥饿72小时后,在解剖镜下分离单只个体,分装入0.2mlEP管中,体积1uL,加入20uL裂解液,95℃30min,0℃5min,再加入20uL缓冲液,混匀;10000g离心2min,取上清,即可得到用于PCR的模板DNA。优点是:时间短,完成时间为1小时;受污染的几率大大降低;精准分析。可直接获得单只轮虫的基因组DNA,PCR结果能用于测序分析;使用低毒的基本裂解液和缓冲液,降低对操作人员的危害。 | ||
搜索关键词: | 一种 轮虫 基因组 dna 快速 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种单只轮虫基因组DNA的快速提取方法,其特征在于:使用裂解液:25mMNaOH,0.2mMEDTA和缓冲液:40mMTris‑HCL,pH5.0的两种试剂,操作过程为:自然水体中获取的轮虫经清洗、饥饿72小时后,在解剖镜下分离单只个体,分装入0.2mlEP管中,体积1uL,加入20uL裂解液,95℃30min,0℃5min,再加入20uL缓冲液,混匀;10000g离心2min,取上清,即可得到用于PCR的模板DNA。
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