[发明专利]一种测定人体中甘胆酸含量的试剂盒及制备方法

摘要

本发明公开了一种测定人体甘胆酸含量的试剂盒，其特征在于包括：甘胆酸R1试剂；甘胆酸R2试剂和甘胆酸校准品；本发明通过用偶联在蛋白上的甘胆酸包被胶乳颗粒并悬浮在特定缓冲液中制作R2试剂。将甘胆酸首先通过化学键偶联在大分子蛋白上，形成多个位点，而分子量较大的蛋白可以更好的与胶乳颗粒结合，偶联有甘胆酸的蛋白进一步通过化学交联方法包被在胶乳颗粒表面。本发明通过在特定缓冲液中加入甘胆酸-蛋白偶联物制作R1试剂，特定缓冲液中要添加无机盐、促凝剂、蛋白质和防腐剂。本发明试剂极大地提高了免疫反应的信号强度，使低含量物质在免疫结合时也能产生较强的浊度反应，以供检测。

主权项

一种测定人体甘胆酸含量的试剂盒，其特征在于包括：甘胆酸R1试剂；甘胆酸R2试剂和甘胆酸校准品； 所述甘胆酸R1试剂由甘胆酸‑蛋白偶联物和缓冲液组成，所述缓冲液为浓度10‑100mM的Tirs‑HCl溶液，所述缓冲液的pH值为7‑8；所述缓冲液中含有浓度2‑6wt%的PEG‑6000、0.7‑0.9wt%的氯化钠、0.05‑0.1wt%的叠氮钠、0.3wt%的PC‑300、0.1‑1wt%牛血清白蛋白以及20mM EDTA；所述甘胆酸R1试剂中甘胆酸‑蛋白偶联物的浓度为0.05‑2mg/mL；所述甘胆酸‑蛋白偶联物是通过偶联剂将甘胆酸和蛋白偶联后获得；所述甘胆酸‑蛋白偶联物中蛋白浓度为0.1‑2.0mg/mL； 所述甘胆酸R2试剂由悬浮缓冲液和甘胆酸‑蛋白抗体包被的胶乳颗粒组成，所述悬浮缓冲液为含有稳定剂和防腐剂的浓度为20‑100mM的甘氨酸‑Na0H缓冲液；所述稳定剂由终浓度0.1‑1.0wt%的牛血清白蛋白、0.7‑0.9wt%的氯化钠、5‑50mM的乙二胺四乙酸二钠、体积浓度0.1‑1.0%TX‑100组成；所述防腐剂为PC‑300，终体积浓度为0.05‑0.1%；所述甘胆酸R2试剂中甘胆酸‑蛋白抗体包被的胶乳颗粒的质量分数为0.05‑1.0%； 所述甘胆酸校准品是由人源性甘胆酸和缓冲液组成，所述缓冲液为浓度50‑200mM的Tirs‑HCl溶液，所述缓冲液中含有终浓度0.1‑1wt%的牛血清白蛋白、0.05‑0.5wt%的PC‑300、5‑50mM的乙二胺四乙酸二钠；所述甘胆酸校准品包括人源性甘胆酸浓度分别为0、2.5、5、10、20、40、80ug/ml的一组校准品。