[发明专利]一种鉴定稻瘟病抗性基因Pi-ta和Pi-b的多重PCR方法有效
| 申请号： | 201410152098.2 | 申请日： | 2014-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN103937890A | 公开（公告）日： | 2014-07-23 |
| 发明（设计）人： | 姚姝;陈涛;王才林;刘燕清;张亚东;朱镇;赵庆勇;周丽慧;赵凌;于新;赵春芳 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 张素卿 |
| 地址： | 210014*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种鉴定稻瘟病抗性基因Pi-ta和Pi-b的多重PCR方法，属于水稻遗传改良与农业生物技术应用领域。根据Pi-ta和Pi-b基因抗、感等位基因的差异，开展了分子标记引物的改良、PCR反应组分的摸索以及循环参数的优化，建立了能同时鉴定稻瘟病抗性基因Pi-ta和Pi-b的多重PCR方法。与单个基因的标记检测方法相比，本发明能够对水稻种质资源或育种群体中Pi-ta和Pi-b的抗、感基因型进行同步鉴定和选择，从而提高稻瘟病抗性基因的聚合育种效率，加速抗病品种的选育。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 稻瘟病 抗性 基因 pi ta 多重 pcr 方法 | ||
【主权项】：
一种鉴定稻瘟病抗性基因Pi‑ta和Pi‑b的多重PCR方法，其特征在于：利用PCR反应体系I中，抗病等位基因Pi‑ta特异性引物：正向Pi‑ta‑F序列：5'‑AGCAGGTTATAAGCTAGGCC‑3'反向Pi‑ta‑R序列：5'‑CTACCAACAAGTTCATCAAA‑3'抗病等位基因Pi‑b特异性引物：正向Pi‑b‑F序列：5'‑GAACAATGCCCAAACTTGAGA‑3'反向Pi‑b‑R序列：5'‑TGGTCCACATGTCAGTGAGC‑3'和PCR反应体系Ⅱ中，感病等位基因pi‑ta特异性引物：正向pi‑ta‑F序列：5'‑AGCAGGTTATAAGCTAGCTAT‑3'反向pi‑ta‑R序列：5'‑CTACCAACAAGTTCATCAAA‑3'感病等位基因pi‑b特异性引物：正向pi‑b‑F序列：5'‑TCGGTGCCTCGGTAGTCAGT‑3'反向pi‑b‑R序列：5'‑TGGAAGCGGATCCTAGGTCT‑3'同时扩增水稻品种的基因组DNA，如果体系I所用两对引物能同时扩增出1,042 bp和365 bp两条特征条带，即为含Pi‑ta和Pi‑b基因的纯合体；如果体系Ⅱ所用两对引物能同时扩增出1,042 bp和803 bp两条特征条带，即为含pi‑ta与pi‑b基因的纯合体；如果体系I和体系Ⅱ分别扩增出1,042 bp和803 bp的特征条带，则为含Pi‑ta与pi‑b基因的纯合个体；如果体系I和体系Ⅱ分别扩增出365 bp和1,042 bp，则为含pi‑ta与Pi‑b基因的纯合个体。
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