[发明专利]一种细胞爬片的制备方法

摘要

一种细胞爬片的制备方法：根据需要剪裁爬片并消毒；将消毒后的爬片完全浸入培养液内，然后放入培养板内；用移液枪吸取细胞悬液，于培养板正上方处垂直地将细胞悬液一次完全打出，使细胞在冲力的作用下均匀分布在爬片上；培养板中加入固定液进行固定；免疫细胞化学染色。本发明为细胞爬片的制备及后续细胞免疫化学提供了一套良好、可靠的具体操作流程及关键技术改进方案。

主权项

一种细胞爬片的制备方法，其步骤为：1）根据需要剪裁爬片，清洗和消毒后取出烤干备用；2）将消毒后的爬片完全浸入培养液内，然后放入培养板内；3）将细胞重悬于培养基中，细胞浓度为1.25～2×10⁵个/ml；4）用移液枪吸取细胞悬液，于培养板正上方处垂直地将细胞悬液一次完全打出，使细胞在冲力的作用下均匀分布在爬片上；5）待细胞种板后，细胞贴壁牢固时去掉上清液，加培养液继续培养；6）将培养板取出，弃去上清液，吸取磷酸盐缓冲液对细胞进行清洗；7）培养板中加入固定液进行固定，固定条件是室温下30～50min，每隔10min轻轻摇晃培养板，使固定液与贴壁细胞充分接触；8）重复用磷酸盐缓冲液洗净固定液，加入磷酸盐缓冲液浸泡并经常更换磷酸盐缓冲液，以避免环境因素对样本的影响；9）免疫细胞化学染色。