[发明专利]一种松江鲈鱼微卫星标记的3重PCR检测方法无效
| 申请号： | 201410118158.9 | 申请日： | 2014-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN103937882A | 公开（公告）日： | 2014-07-23 |
| 发明（设计）人： | 张志勇;张志伟;徐献明;许津;沈德华;张曹进;吴建平;吴国均;任忠宏 | 申请（专利权）人： | 江苏省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达 |
| 地址： | 226007 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种松江鲈鱼微卫星标记的3重PCR检测方法，包括（1）松江鲈鱼鳍条基因组DNA提取与稀释；（2）微卫星引物的合成；（3）PCR反应体系及扩增程序优化；(4)PCR产物检测。本发明建立了进行松江鲈鱼亲子鉴定、遗传多样性分析、遗传结构比较的3重PCR反应体系，实现了在一个PCR反应中同时检测3个微卫星位点。本发明操作简便快捷、效率高，可以在松江鲈鱼濒危物种保护、种群遗传结构分析、遗传图谱构建、种质鉴定中得到应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 松江 鲈鱼 卫星 标记 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种松江鲈鱼微卫星标记的3重PCR检测方法，包括：（1）剪取松江鲈鱼的鳍条，提取基因组DNA；（2）合成不同位点的微卫星正反向引物，引物序列如下：SJL‑C47：F:GGAGGCGGATGATGTTGGA；R:ACTGCGGTAATGTGCGTTTC；SJL‑B61：F:ACCAGTTCCATCCAGCAGTTG；R:CCGACACGCTCACCGTATTTC；SJL‑D25：F:GAATGCGGGTTCAAGGTAG；R:GGCACATAACGGCTTCACTG；（3）运用优化好的PCR扩增体系和扩增程序对不同松江鲈鱼个体进行3重PCR扩增；（4）对PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，确定个体的基因型，获得松江鲈鱼遗传多态性图谱。
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