[发明专利]用于海豚链球菌LAMP-LFD可视化检测的引物和探针及引物和探针的应用有效
申请号: | 201410117990.7 | 申请日: | 2014-03-27 |
公开(公告)号: | CN103952472A | 公开(公告)日: | 2014-07-30 |
发明(设计)人: | 陈炯;周前进 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/14;C12N15/11;C12R1/46 |
代理公司: | 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 | 代理人: | 周珏 |
地址: | 315211 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了用于海豚链球菌LAMP-LFD可视化检测的引物和探针及引物和探针的应用,特点是包括三对LAMP的引物gyrB-F3、gyrB-B3;gyrB-FIP,gyrB-BIP;gyrB-LF、gyrB-LB和一条探针gyrB-HP,核苷酸序列如SEQIDNO.1-EQIDNO.7所示,利用上述的引物和探针,通过LAMP反应体系扩增步骤,探针杂交LAMP反应产物步骤,使用LFD检测步骤实现海豚链球菌的可视化检测并进一步用于试剂盒的制备,优点是具有更高的快捷性、特异性和灵敏度,仪器需求简单,有利于海豚链球菌的早期诊断和检测,可满足基层检测机构和现场疫源地检测的需要。 | ||
搜索关键词: | 用于 海豚 链球菌 lamp lfd 可视化 检测 引物 探针 应用 | ||
【主权项】:
一种用于海豚链球菌LAMP‑LFD可视化检测的引物和探针,其特征在于:根据海豚链球菌gyrB基因序列(GenBank登录号:KC560771.1)设计LAMP‑LFD的三对引物序列和一条探针序列,引物序列具体如下:gyrB‑F3:5’‑GAAGATGATTCCATTACCGTTG‑3’,gyrB‑B3:5’‑CTAAATCTTCTCCTACCACACC‑3’,gyrB‑FIP:5’‑TGAAACCTTATAACCGCCTCCGttttCTGCTGTTGAAACAGTCTTTAC‑3’,gyrB‑BIP:5’‑GGTCTGCATGGGGTTGGTTttttAACCCGGACATCTAACTGT‑3’,gyrB‑LF:5’‑TACCTCCAGCATGGAGAACT‑3’,gyrB‑LB:5’‑TCAGTTGTTAATGCCCTCTCAA‑3’,探针gyrB‑HP:5’‑GTTTCAGGTGGTCTGCATG‑3’,其中gyrB‑FIP的5’端为生物素标记,探针gyrB‑HP5’端为异硫氰酸荧光素标记。
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