[发明专利]产干扰素酿酒酵母菌株在种子罐水平的发酵方法

摘要

本发明是一种产干扰素酿酒酵母菌株在种子罐水平的发酵方法，其步骤如下：将产干扰素的酿酒酵母菌种进行活化，制得一级菌种制备；将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15Mpa；进行空消；配置70L培养基：培养基组成为磷酸，氯化钙，硫酸钾，氢氧化钾，葡萄糖，硫酸镁，酵母浸膏；再进行种子罐实消；最后种子罐接种培养：按照5%的接种量，将3.5L一级菌种接种到含有70L液体培养基的种子罐中，调节培养温度在27-29℃，压力0.05Mpa，pH4.0-4.5之间，培养24h。本发明方法设计更为合理，可以实现达到最大的生物产量。

主权项

一种产干扰素酿酒酵母菌株在种子罐水平的发酵方法，其特征在于：其步骤如下：（1）一级菌种制备：将产干扰素的酿酒酵母菌种进行活化，首先在麦芽汁培养基平板上进行划线培养，培养温度为28℃，培养时间为32h；挑选单菌落，接种到1L麦芽汁培养基中，4瓶，共计4L，培养温度28℃，培养时间16h；（2）种子罐空消：空消时，将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15Mpa；空消过程中，维持蒸汽温度121℃左右，先开排污水阀和进气阀，排空夹套水，在对管路、滤器和种子罐发酵罐灭菌，空消时间为30分钟；（3）配置70L培养基：培养基组成为磷酸，氯化钙，硫酸钾，氢氧化钾，葡萄糖，硫酸镁，酵母浸膏，配比依次为21.2: 4: 12.3: 2.8: 27: 10.1: 22.6；按上述比例配制培养基10kg，加入空消后的种子罐，再加水至70L左右，利用1mol/L的NaOH调节pH在4.0‑4.5范围内；种子罐体积为100L，液体适宜量为70‑75L；（4）种子罐实消：实消先利用夹套通蒸汽对培养基进行预热，保持夹套压力≤0.1 Mpa，待培养基温度到达100℃后，关闭夹套蒸汽，改为直接向罐内通入蒸汽；当罐压升至0.12Mpa，温度升到121~123℃时，控制蒸汽阀门开度，保持罐压不变，30分钟后停止供汽；打开冷却水的进排阀门，在夹套内通水冷却；（5）种子罐接种培养：按照5%的接种量，将3.5L一级菌种接种到含有70L液体培养基的种子罐中，调节培养温度在27‑29℃，压力0.05 Mpa， pH4.0‑4.5之间，培养24h。