[发明专利]一种血液中亚硝酸盐的检测方法

摘要

本发明公开了一种血液中亚硝酸盐的快速检测方法。利用多孔板和酶标仪测定亚硝酸盐与Griess形成的有色络合物的吸光度，将不含亚硝酸盐血液作为制作工作曲线基体溶液，消除了血液基体的干扰，提高检测的灵敏度及准确性。方法具有准确度高、检测样本量大、检测样品量少、检测效率高等特点。

主权项

一种血液中亚硝酸盐的检测方法，包括以下步骤：（1）亚硝酸盐标准工作曲线的制作①基体空白溶液的制备：取10mL不含亚硝酸盐的新鲜加抗凝剂血液，放入离心机中离心，取上清液5mL，加入由0.2mol/L氢氧化钠溶液1mL和硫酸锌1.0g组成的蛋白脱色剂，混合均匀，离心分离，取出上清液，得到几乎无色、透明的基体空白溶液；②分别取浓度为1.0μg/mL的NO2‑ 20、40、60、80、100μL标准溶液于微量试管中，用步骤①制备好的基体空白溶液稀释至500μL，加入GriessA试剂25μL，混合均匀；1min后加入GriessB 试剂25μL，混合均匀，取200μL混匀显色液于酶标板中，在酶标仪波长490nm处测定吸光度，制作工作曲线，得到亚硝酸盐的检测限和线性回归方程；（2）样品测定血液的检测：取5mL新鲜加抗凝剂血液，放入离心机中离心，取上清液2mL，加入由0.2mol/L氢氧化钠溶液0.4mL和硫酸锌0.4g组成的蛋白沉淀脱色剂，涡旋混合均匀1min，离心分离，取出上清液500μL微量试管中，加入GriessA试剂25μL，混合均匀；1min后加入GriessB 试剂25μL，混合均匀，取200μL混匀显色液于酶标板中，在酶标仪波长490nm处测定吸光度，并对照步骤（1）所得的线性回归方程，计算出样品中亚硝酸盐的含量。