[发明专利]一种基于人工修饰引物的定量突变检测系统有效
| 申请号： | 201410044150.2 | 申请日： | 2014-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN103789436A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 思博奥科生物信息科技（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100070 北京市丰台*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域。更具体而言，本发明涉及基因突变的检测。本发明提供了一种基于人工修饰引物的定量突变检测系统。本发明的定量突变检测系统主要包括引物设计、PCR反应和产物检测三个步骤。通过在引物3’端5个碱基的区域内引入一个或者一个以上的人工突变，并基于调节3’端引物与模板结合的热力学性质来确保DNA聚合酶结合时具有一定的稳定性，但又不至于太高，从而降低了假阳性，显著提高了选择性；通过在引物5’端加荧光以及联用荧光毛细管电泳来检测PCR产物，进一步提高了选择性，并可实现对样品突变的半定量分析。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 人工 修饰 引物 定量 突变 检测 系统 | ||
【主权项】：
一种用于检测突变的方法，所述方法包括如下步骤：1）针对要检测的突变，设计外引物和内引物的组合，在所述内引物3’端5个碱基的区域，从3’到5’的方向，依次按照热力学稳定性“高低高低”或者“低高低高”的高低相间模式来引入人工错配；2）以引物进行PCR反应，得到配对扩增的产物；3）对所述产物进行半定量分析。
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